SN_T 0122-2011进出口肉及肉制品中甲萘威残留量检验方法 液相色谱-柱后衍生荧光检测法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 0122—2011代替 SN 0122-1992进出口肉及肉制品中甲萘威残留量检验方法氵液相色谱-柱后衍生荧光检测法Determination of carbaryl residues in meat and meat products for import andexport-HPLC-fluoresce detector with post column derivation2011-07-01实施2011-02-25发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T 0122—2011前言本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准代替SN0122一1992《出口肉及肉制品中甲萘威残留量检验方法》。本标准与 SN0122-1992相比，主要技术变化如下：样品净化方法采用全自动凝胶渗透色谱净化方法替代原有的液液分配法；测定采用柱后衍生液相色谱-荧光检测法。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局。本标准主要起草人：葛宝坤、赵孔祥、陈其勇、陈旭艳。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：SN 0122-1992。 SN/T 0122—2011进出口肉及肉制品中甲萘威残留量检验方法‧液相色谱-柱后衍生荧光检测法1范围本标准规定了进出口肉及肉制品中甲萘威残留量的液相色谱-柱后衍生荧光检测法。本标准适用于进出口牛肉、鸡肉~虾肉~鱼肉及火腿罐头中甲萘威残留量的测定。2　规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3制样3.1 肉将所取全部样品，充分搅碎混匀，取有代表性的样品，总量不少于500g，装人清洁容器内，密封并标明标记。3.2罐头将所取全部样品整罐倒出，充分搅碎混匀，取有代表性的样品，总量不少于500g，装人清洁容器密封并标明标记。4试样保存试样应于一18℃以下保存。在抽样和制样的操作中，应防止样品受到污染或发生含量的变化，以保证实验样品能代表总体样本。原理5用丙酮-石油醚混合溶液提取样品中的甲萘威残留物，经凝胶层析柱净化后，浓缩，高效液相色谱分离，经柱后衍生后，用荧光检测器检测，外标法定量。6试剂和材料本标准所用试剂和水在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂，有机试剂为色谱纯和GB/T6682中规定的三级水。6.1 乙腈。6.2 乙酸乙酯。1 SN/T 0122—20116.3环已烷。6.4 丙酮。6.5石油醚:沸程30℃～60℃。6.6无水硫酸钠：650℃灼烧4h，在干燥器内冷却至室温，贮于密封瓶中备用。6.7氯化钠。6.8柱后衍生试剂。6.8.1氢氧化钠溶液（0.2%，质量浓度）。6.8.2今邻苯二甲醛（O-Phthaladehyde,OPA）。6.8.3邻苯二甲醛稀释液：硼砂溶液（0.4%，质量浓度）。6.8.4巯基乙醇(Thiofluor)。6.8.5邻苯二甲醛试液的配制：溶剂储罐中注人945mLOPA稀释剂，用惰性气体（氮气）吹扫至少10min，100mgOPA固体溶解于约10mL的色谱纯甲醇中，将OPA溶液加人除氧的OPA稀释剂中，溶解2g巯基乙醇固体于5mLOPA稀释剂中，加入到储罐中，盖上瓶盖，打开气流，再不断的吹扫几分钟，关闭排气阀，轻轻地搅动溶剂以使其完全混合。6.9乙酸乙酯-环已烷混合溶液（1+1，体积比）。6.100.45 μm尼龙滤膜。6.11甲萘威：分子式C12H11NO2，CAS编号63-25-2,纯度大于99.5%。6.12甲萘威标准储备液：准确称取适量的甲奈威标准品，以乙腈溶解，4℃冰箱保存，有效期为6个月。6.13甲萘威标准工作液：取一定量的标准储备液，用乙腈稀释至适当浓度，4℃冰箱保存，有效期为1周。71仪器和设备7.1液相色谱仪：配有荧光检测器和柱后衍生单元。7.2全自动凝胶色谱仪（配有馏分收集浓缩器）。7.3旋转蒸发装置。7.4氮吹仪。7.5 组织匀浆机。7.6 振荡器。8分析步骤8.1提取及净化8.1.1样品的提取称取试样20 g(精确到0.01g)，于100mL具塞三角瓶中，加水6mL（视样品水分含量加水使总水量约20g，肉通常在70%左右，加水 6mL），加40 mL丙酮，匀浆1min，加氯化钠6g，充分摇匀，再加30mL石油醚，振摇30min。取 35mL有机层上清液，经无水硫酸钠滤于旋转蒸发瓶中，浓缩至约1 mL，加2mL乙酸乙酯-环已烷（6.9)溶液再浓缩，如此重复 3次。乙酸乙酯-环已烷（6.9）定容为5 mL，0.45 μm滤膜过滤,待净化。8.1.2样品的凝胶色谱(GPC)净化凝胶色谱