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1 生物工程资料 植物细胞工程 一、专业符号 生长素类： IAA 吲哚乙酸 IBA 吲哚丁酸 NAA 萘乙酸 2,4-D 2,4-二氯苯氧乙酸 细胞分裂素类： KT 激动素 6-BA (6-BAP) 6-苄基氨基嘌呤 ZT 玉米素 GA3 赤霉酸 ABA 脱落酸 醋酸酯荧光素(FDA)染色法 DMSO 二甲基亚砜 二、名词解释 1、微室培养法： 人工创造一个小室， 将单细胞培养在小室中的少量培养基上， 使其分裂增殖形成细胞团的方 法。 2、看护培养法： 用一块愈伤组织或者植物离体组织看护单细胞使其生长增殖的一种单细胞培养方法。 3、绿岛法： 在植株上使叶面细胞产生突变并创造选择压力， 令抗性突变细胞正常生长形成绿色斑点， 谓 之“绿岛”，其为突变细胞，分散和培养后可得完整植株 4、植物原生质体： 除去纤维素外壁且具有生活力的裸体植物细胞 5、体细胞胚胎发生途径： 指由培养细胞诱导分化出具胚芽、胚根、胚轴的胚状结构，进而长成完整植株。 6、愈伤组织： 脱分化后的细胞，经过细胞分裂，产生无组织结构、无明显极性的、松散的细胞团。 7、细胞分化： 是指导致细胞形成不同结构，引起功能改变或者潜在发育方式改变的过程 8、细胞悬浮培养(cell suspension culture)： 将单个游离细胞或者小细胞团悬浮在液体培养基中进行培养增殖的技术。 9、细胞平板培养： 将制备好的单细胞悬浮液， 按照一定的细胞密度， 与融化的琼脂培养基均匀混合， 并平铺一 薄层在培养皿底上的培养方法 10、器官发生途径： 离体培养的组织、 细胞在诱导条件下经分裂和增殖再分化形成根和芽等器官的过程。有两种 发生方式： (1) 直接发生： (具有初生分生能力的) 外植体直接分化成器官的过程。 (由茎尖、 腋芽、原球茎、块茎、鳞茎等器官发生)；(2)间接发生：外植体(已分化的成熟组织)经 脱分化形成愈伤组织再分化形成器官的过程。 11、Ti 质粒： 农杆菌染色体外的遗传物质， 为双链共价闭合的环状 DNA 份子， 有三个功能区： T-DNA 区， 病毒区(Vir 区)和冠瘿碱代谢基因的编码区。在 T-DNA 区和 Vir 区基因的协同作用下，农杆 菌完成侵染植物细胞和转移 T-DNA 的过程。 12、植物细胞脱分化： 离体培养条件下，一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或者分生组织细胞状态或者胚性细胞 的状态的过程。 三、填空题： 1、植物细胞大规模培养方式主要有：分批培养法，连续培养法，半连续培养法和固定化培 2 生物工程资料 养法 2、诱导植物细胞融合的因素主要有： PEG 诱导； NaNO3诱导；高钙和高 PH 诱导；高钙和 高 PH 及 PEG 结合诱导 3、普通认为形成的器官的类型受培养基中两类激素的相对浓度的控制，较高浓度的 生长 素 有利于根的形成而抑制芽的形成，相反，较高浓度的 细胞分裂素 则促进芽的形成 而抑制根的形成。 4、植物原生质体发育及植株再生途径主要有：细胞壁再生；细胞分裂和生长；愈伤组织形 成与分化；植株再生 5、制备植物原生质体过程中，酶解去细胞壁时，为保证原生质体的稳定性，常加入渗透稳 定剂 (①糖溶液系统：包括甘露醇、山梨醇、蔗糖和葡萄糖等；②盐溶液系统：包括 KCl、 MgS04 和 KH2PO4 等);细胞质膜稳定剂 (葡萄糖硫酸钾、 MES、CaCl?2H2O、KH2PO4 等). 6、植物原生质体制备需要的酶：纤维素酶和果胶酶 7 、常用的生长素有_ 吲哚乙酸___、_萘乙酸___、_2,4-D__ 、_吲哚丁酸__等，常用的细胞 分裂素__激动素__ 、__6-苄基氨基嘌呤__、_玉米素_ 8 、由愈伤组织再生植株有两条途径： 一步成苗 (原生质体形成的愈伤组织直接转移到分化 培养基上可一步成苗)和两步法成苗 (即首先将愈伤组织培养于含低浓度生长素培养基上， 让其增殖和调整状态，再其转移到分化培养基上分化成苗) 四、问答题 1、植物细胞实验室培养方法有哪几种？ ①液体浅层培养法：将悬浮在培养液中的细胞过滤得到游离单细胞和小细胞团， 培养在浅层 液体培养基中。 用途： 主要用来增殖细胞。 特点： 有利于有毒物质的扩散； 有利于气体交换； 不利于定点观察；单细胞生长、分裂后，难以得到单细胞系； ②固体平板培养法：将制备好的单细胞悬浮液， 按照一定的细胞密度， 与融化的琼脂培养基 均匀混合， 并平铺一薄层在培养皿底上的培养方法。用途：是为了分离单细胞无性系，研究 其生理、 生化的遗传上的差异而设计的一种单细胞培养技术。 广泛应用于细胞、 原生质体及 融合产物的培养。特点： 可以定点观察； 分离单细胞系比液体浅层培养容易；培养细胞气体 交换不畅；