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核酸检测是怎么发现新冠病毒的?一文搞懂!
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这段时间,我们常能听到一个词:核酸检测。
现在已经众所周知,核酸检测在新冠病毒感染的诊断中发挥着关
键作用。在医院,核酸检测是诊断新冠病毒感染的金标准。
而在医院之外,核酸检测还可以用来做大范围的筛查,尽可能找
出还在潜伏期的无症状感染者。尤其当下复工在即,筛查可以大大降
低办公室传染的风险。
可你们知道核酸检测是怎么发现病毒的吗?这种黑科技是怎么让
看不见的病毒“显形”的?
现在小编就来给大家说说核酸检测的原理。全文简单易懂,一起
涨知识!
首先认识一下,什么是核酸?
核酸是地球上所有已知的生命体必不可少的一种组成物质。它主
要分为两种:脱氧核糖核酸、核糖核酸。
脱氧核糖核酸,其实就是我们常说的 DNA ,地球上几乎所有生物
的遗传物质。而许多冠状病毒的遗传物质 ,则是 RNA ,也就是核糖核
酸。
所以病毒核酸检测,其实就是对病毒的遗传物质 RNA 进行检测。
而针对病毒 RNA 进行检测的技术 ,还可以分两种:一种是实时荧
光 RT-PCR ,一种是病原宏基因组测序(mNGS )
*图为冠状病毒。它的外层是包膜和蛋白质,里面是它的遗传物质
RNA。
它们都是用于诊断新冠病毒感染的方法。但核酸检测因为速度快
(4~6 小时)而应用更多,而基因测序比较慢(24~72 小时),所以
用的比较少。
一般对于高度疑似新冠病毒感染、但核酸检测是阴性的病人,会
利用基因测序技术进一步确认。
图为《新型冠状病毒肺炎诊疗方案》试行第六版,新型冠状病毒
肺炎确诊的病原学依据
实时荧光 RT-PCR 检测是如何让病毒“显形”的?
首先要采集样本。由于新冠病毒是通过呼吸道感染人体,所以样
本要从呼吸道采集。目前常规的样本类型大致有 2 类:一类是用咽拭
子、鼻拭子在人的上呼吸道(咽部或鼻腔)擦拭采集;另一类是收集
下呼吸道痰液、支气管灌洗液、肺泡灌洗液等。
采集到的样本将被严格封存,送到实验室。那里是检测员让病毒
“现形”的战场。
什么是实时荧光 RT-PCR ?
为了避免晦涩难懂,此处略去几百个火星文。小编将通过一个大
致的检测流程来介绍这一黑科技。我们还实拍了水母基因实验室里的
设备和工具 ,并 由可爱的实验室小姐姐友情出镜 ,给大家做一个操作
演示。
① 提取病毒的 RNA
先从样本中提取出病毒的 RNA。具体来说 ,就是在样本中加入核
酸提取试剂,把病毒破坏,让核酸释放出来。
*提取病毒核算必须在高级别的生物安全柜内完成。图为水母实验
室小姐姐使用生物安全柜进行的操作演示。
② 把病毒 RNA“反转录”成 cDNA
通过反转录技术( RT ),把病毒的 RNA“反转”成一种特异
DNA ,即cDNA (因为病毒RNA 结构不稳定,所以把病毒 RNA 转换
成稳定的 cDNA 会更方便检测)
这里会用到核酸检测试剂盒中一种叫“反转录酶”的物质。而完
成转录后,所有工作都将围绕 cDNA 展开。
③ 进行 cDNA 的扩增与检测
简单说就是扩增 cDNA 的数量。这里应用的就是 PCR ,全称聚合
酶链式反应。具体来说,就是借助试剂盒中一些特殊物质,让 cDNA
不断复制,使其数量呈指数式增长。
所谓 RT-PCR ,就是将 RNA 的反转录
(RT )和 cDNA 的扩增(PCR )相结合的技
术。
当 cDNA 扩增的同时,试剂盒中还有一种叫荧光探针的东西同时
工作。它会释放荧光信号,cDNA 每完成一次扩增,荧光信号就会增
加一点,而 PCR 检测仪就能记录到一个荧光信号增加的 Ct 值。
*图中左边白色的仪器叫 QPCR 仪。上面说到的转录、扩增、检测
都是在这台 QPCR 仪上完成。电脑上显示的红线,我们也可以理解为
Ct 值的曲线。
④ 出结果
这一步就是根据检测仪记录的 Ct 值,进行检测结果分析。
理想状态下,如果样本中有新冠病毒,那么在 cDNA 完成预订次
数的扩增后,检测仪记录的 Ct 值就会形成一个逐渐上升的 S 形曲线,
检测结果为阳性;如
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