SN_T 4654-2016出口蜂蜜中氯舒隆残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4654—2016出口蜂蜜中氯舒隆残留量的测定液相色谱-质谱／质谱法Determination of clorsulon residue in honey for export-LC-MS/MS method2017-03-01实施2016-08-23发布中华人民共和国O发布国家质量监督检验检疫总局涂层查真伪 SN/T 4654-2016前言本标准按照GB/T 1.1一2009给出的规则起草本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国秦皇岛出人境检验检疫局、中华人民共和国吉林出人境检验检疫局。本标准主要起草人：曹彦忠、贾光群、吴连鹏、王蕾、李响、石玉秋、宋翱。1 SN/T 4654--2016出口蜂蜜中氯舒隆残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法1范围本标准规定了出口蜂蜜中氯舒隆残留量的液相色谱-质谱/质谱测定方法。本标准适用于出口蜂蜜中氯舒隆残留量的定量测定和确证。2规范性引用文件下列文件对于本文的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682　分析实验室用水规格和试验方法3方法提要试样中的氯舒隆用三羟甲基氨基甲烷缓冲溶液（pH=9)提取，提取液经C18固相萃取柱净化，液相色谱-质谱/质谱仪检测和确证，外标法定量。4　试剂和材料除非另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。4.1甲醇：色谱纯。4.2乙腈：色谱纯。4.3三羟甲基氨基甲烷(Tris):优级纯。4.4氯化钙(CaCl²·2H,O)：优级纯。4.5盐酸：优级纯。4.6氯舒隆(Clorsulon)标准物质:C:H:C13 N;O4S2,CASNo.60200-06-8,纯度≥99%。4.70.1 mol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris)缓冲溶液:称取12.0 g 三羟甲基氨基甲烷(4.3)和 7.35 g氯化钙（4.4），放人1000 mL烧杯中，加人800 mL水溶解，用盐酸（4.5）调至pH值为 9.0，再用水定容至1 000 mL。4.80.1mg/mL标准储备溶液：准确称取适量的氯舒隆标准物质（4.6），用甲醇配成0.1 mg/mL的标准储备溶液。4.91.0 μg/mL标准工作溶液：准确吸取标准储备溶液（4.8)0.1 mL移至10 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度。4.10固相萃取柱：填料为 ProElut C1-Ul)或相当者,1000 mg，6 mL。使用前依次用5 mL甲醇（4.1）和 10 mL水活化，保持柱体湿润。1）非商业性声明：文中列出的固相萃取柱填料类型仅是为了提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试采用不同厂家或型号的固相萃取柱。1 SN/T 4654—20164.11 滤膜:0.2 μm。尼龙。5仪器和设备5.1超高效液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源(ESI)。5.2分析天平：感量0.0001g和0.01g。5.3液体混匀器。5.4玻璃贮液器:约 50 mL。下端带磨口，可连接固相萃取柱。5.5固相萃取装置。5.6110 mL玻璃刻度管。5.7玻璃棉：甲醇浸泡,使用前用去离子水将甲醇冲洗干净。6试样的制备与保存6.1i试样的制备对无结晶的实验室样品，将其搅拌均匀。对有结晶的样品，在密闭情况下，置于不超过60℃的水浴中温热，振荡，待样品全部融化后搅匀，冷却至室温。分出0.5kg作为试样。制备好的试样置于样品瓶中，密封，并作上标记。6.2试样保存将试样于常温下保存。7测定步骤7.1　提取称取5g试样,精确至0.01g。置于150 mL三角瓶中，加人20 mLTris缓冲溶液，于液体混匀器上快速混匀1 min，使试样完全溶解。7.2　净化将塞有玻璃棉的玻璃贮液器连到ProElut C18-U固相萃取柱上，把样液倒人贮液器中，调节流速小于3mL/min，待样液完全流出后，用10 mL水洗柱，弃去全部流出液。用4 mL 乙腈洗脱于10 mL刻度管中,加水定容至10mL。过0.2μm滤膜后，供液相色谱-串联质谱仪测定。7.3基质空白溶液的制备按7.1和7.2操作步骤，制备用于配制系列基质标准工作溶液的样品空白提取液。7.4测定条件7.4.1液相色谱参考条件：a）色谱柱:Cis柱,100 mmX2.1 mm(内径),1.8 μm;b)流动相:A:乙,B:水。梯度洗脱条件见表1。c)进样量：10 μL;d)柱温:30℃;2 SN/T 4654—2016e)流速:0.3 mL/min。表1梯度洗脱条件B时间/minA5950.050500.580201.0202.0805953.05955.07.4.2质谱参考条件：a)电离方式：电喷雾电