NY_T 2638-2014稻米及制品中抗性淀粉的测定 分光光度法.pdf

ICS 67.060X 11NY中华人民共和国农业行业标准NY/T2638—2014稻米及制品中抗性淀粉的测定分光光度法Determination of resistant starch in rice and products-Spectrophotometry method2015-01-01实施2014-10-17发布中华人民共和国农业部发布 NY/T2638—2014前言本标准按照GB/T1.1--2009给出的规则起草。本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。本标准起草单位：中国水稻研究所、农业部稻米及制品质量监督检验测试中心。本标准主要起草人：方长云、徐霞、朱智伟、段彬伍、陈能- NY/T 2638—2014稻米及制品中抗性淀粉的测定分光光度法1范围本标准规定了稻米及制品中抗性淀粉测定的分光光度法本方法适用于抗性淀粉含2%～61%的稻米及制品的测定。2规范性引用文件下列义件对本义件的引用是必不可少的。凡是注日期的引用义件，仅注日期的版本适用于本义件。凡是不注日期的引用义件.其最新版本（包括所有的修改单适用于本义件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理用α-胰腺淀粉酶和淀粉葡萄糖酶将试样中非抗性淀粉水解为葡萄糖，然后加人乙醇，经离心获得抗性淀粉颗粒，将之溶于氢氧化钾溶液.用淀粉葡萄糖背酶水解成葡萄糖后，与葡萄糖氧化酶一过氧化物酶反应产生显色复合物.在510nm测定其吸光度值，吸光度值与抗性淀粉含量成正比。4试剂除非另有规定，仅使用分析纯试剂.水为GB/T6682规定的三级水。4.1氢氧化钠(Na()H)。4.2氢氧化钾(KO)H)。4.3二水合氯化钙(CaCl·2H.()。4.4叠氮化钠（NaN）。警告—叠氮化钠为剧毒物品，操作不当可引起爆炸。4.5磷酸二氢钾(KH.P):）。4.6 盐酸(HCI)。4.7马来酸(C,H(),)。4.8苯甲酸(C,Hs()）。4.94-氨基安替比林(CHlsN:())。4.10对羟基苯甲酸(C,H()）。4. 11 乙醇(CH:CH()H)。4.12 冰乙酸(CHC()OH)。4.13α-胰腺淀粉酶。4.14葡萄糖氧化酶。4. 155过氧化物酶。4.16D-葡萄糖标准品（CHz（).纯度：99.5%）。4.17氢氧化钠溶液[c（Na()H）=4.0mol/I.]：称取160.0g氢氧化钠加适水溶解后定容至1000ml。4.183氢氧化钠溶液[c（Na()H)=2.0mol/I]：称取80.0g氢氧化钠加适量水溶解后定容至1000mL。1 NY/T2638—20149氢氧化钾溶液c（K0H）=2.0mol/1]：称取112.2g氢氧化加适量水溶解后定容至1000ml。4.19该溶液在室温下可保存12个月。4.20盐酸溶液[c（HC1)=2.0mol/L]：量取180.0ml盐酸，加适量水并稀释至1000ml。4.21苯甲酸溶液[c(C,H.C0)H)=0.2%]：称取0.2g苯甲酸溶于水定容至100ml.。4.22马来酸钠缓冲液c（C:H.()C()O)Na）=100mmol/LpH6.0］：称取23.2g马来酸溶于1600ml水中，用氢氧化钠溶液（4.17)调至pH为6.0.然后加入0.6g二水合氯化钙和0.4g叠氮化钠.最后定容至2000ml。该溶液在4℃可保存12个月。4.23乙酸钠缓冲液[c（CH.C(ONa）=1.2mol/L，pH3.8]：量取70ml.冰乙酸至800ml.水中，用氢氧化钠溶液（4.17)调至pH为3.8，最后定容至1000mL。该溶液在室温下可保存12个月。4.24乙酸钠缓冲液[c（CHCOONa)=100mmol/L.pH4.5]：量取5.8ml冰乙酸至900ml.水中.用氢氧化钠溶液（4.17)调至pH为4.5.最后定容至1000ml。该溶液可在4℃保存2个月。4.25乙醇溶液[c（CH；CHOH)=50%.体积分数]：500mL无水乙醇加水定容至1000ml。该溶液在室温下可保存12个月。4.26淀粉葡萄糖苷酶原液AMG（3300U/mI）：直接购买使用。该溶液在4℃可保存5年。4.27淀粉葡萄糖苷酶使用液（300U/mL）：吸取2.0mLAMG（4.26)用马来酸钠缓冲液（4.22)稀释至22ml，分装于聚丙烯塑料管，放于一20℃保存。4.28α-胰腺淀粉酶悬浮液[10mg（30U/mL)+AMG(3U/mL)]：称取1.0gα-胰腺淀粉酶溶于100ml,马来酸钠缓冲液（4.22）中，搅拌5min。加人1.0mL淀粉葡萄糖苷酶使用液（4.27），混匀后，1500g离心10min，取上清液。该溶液现配现用。4.29G0POD氨基安替比林储备液：称取136.0g磷酸二氢钾42.0g氢氧化钠和30.0g对羟基苯甲酸至900mL水中溶解.用盐