NY_T 548-2015猪传染性胃肠炎诊断技术.pdf

ICS 11.220B 41NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 548—2015代替NY/T548—2002猪传染性胃肠炎诊断技术Diagnostic techniques for transmissible gastroenteritis2015-05-21 发布2015-08-01实施中华人民共和国农业部5发布 NY/T 548—2015前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准代替NY/T548—2002《猪传染性胃肠炎诊断技术》。本标准与NY/T548-2002相比，病原检测部分增加了RT-PCR检测方法。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国动物防疫标准化技术委员会（SAC/TC181)归口。本标准起草单位：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所。本标准主要起草人：冯力、陈建飞、时洪艳、张鑫本标准的历次版本发布情况为：-NY/T 548--2002。I NY/T548—2015猪传染性胃肠炎诊断技术1范围本标准规定了猪传染性胃肠炎的病原学检测和血清学检测。病原学检测包括病毒分离鉴定、直接免疫荧光法、双抗体夹心酶联免疫吸附试验和反转录一聚合酶链式反应。血清学检测包括血清中和试验和间接酶联免疫吸附试验。本标准适用于对猪传染性胃肠炎的诊断、产地检疫及流行病学调查等。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法GB19489实验室生物安全通用要求GB/T27401实验室质量控制规范动物检疫3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3. 1猪传染性胃肠炎 transmissible gastroenteritis ,TGE猪传染性胃肠炎是由尼多目（Nidovirales）、冠状病毒科（Coronaviridae）、α-冠状病毒属的猪传染性胃肠炎病毒（transmissiblegastroenteritisvirus，TGEV）引起的猪的一种急性、高度接触传染性的肠道疾病，以呕吐、水样腹泻、脱水和10日龄以内仔猪的高死亡率为主要特征。4缩略语下列缩略语适用于本文件。CPE：cytopathic effect细胞病变作用。DIA:direct Immunofluorescence assay直接免疫荧光法。ELISA：enzyme-linked immunosorbent assay酶联免疫吸附试验。PBS:phosphatebuffered saline磷酸盐缓冲液。PRCV:porcinerespiratorycoronavirus猪呼吸道冠状病毒。TGE:transmissible gastroenteritis 猪传染性胃肠炎。RT-PCR：reverse transcription-polymerase chain reaction反转录一聚合酶链式反应。5临床诊断5.1流行特点TGE的发生和流行有暴发流行、地方流行和周期性地方流行3种形式。若感染了TGEV的变异株PRCV，则会出现不同的流行模式，从而使TGEV的流行更加复杂化。本病一年四季均可发生，一般多发生在冬季和春季，有时也发生于夏季、秋季。各种年龄的猪均可感染，尤其是10日龄以内的哺乳仔猪，发病率和死亡率可高达100%。病猪、带毒猪和隐性感染猪是本病的主要传染源。病毒通过粪一口I NY/T 548—2015途径、气溶胶或感染母猪的乳汁进行传播。5.2临床症状本病的潜伏期较短，通常为18h至3d。感染发生后，传播迅速，2d～3d可波及整个猪群。临床表现因猪龄大小而异，新生仔猪的典型症状是呕吐、水样腹泻、脱水、体重迅速下降，导致新生仔猪高发病率和高死亡率。腹泻严重的仔猪，常出现未消化的乳凝块。粪便腥臭，病程短，症状出现后2d～7d死亡。泌乳母猪发病，则过性体温升高、呕吐、腹泻、厌食、无乳或泌乳量急剧减少，小猪得不到足够乳汁，进一步加剧病情，营养严重失调，增加了小猪的病死率。3周龄仔猪、生长期猪和出栏期猪感染时仅表现厌食，腹泻程度较轻，持续期相对较短，偶尔伴有呕吐，极少发生死亡。5.3病理变化TGEV引起的腹泻，尽管症状很严重，但是病理变化较轻微。肉眼可见的病理变化常局限于消化道，特别是胃和小肠。胃膨胀，胃内充满凝乳块，胃黏膜充血或出血，胃大弯部黏膜淤血。小肠壁弛缓、膨满，肠壁菲薄呈半透明。小肠内容物呈黄色、透明泡沫状的液体，含有凝乳块。空肠黏膜可见肠绒毛萎缩，哺乳仔猪肠系膜淋巴管的乳糜管消失组织学变化主要以空肠为主，从胃至直肠呈广范围的渗出性卡他性炎症变化。其特征是肠绒毛萎缩变短，回肠变化稍轻微。小肠变化有较明显的年龄特征，新生猪变化严重。电子显微镜观察，可见小肠上皮细胞的微绒