SN 1626-2005进出口肉及肉制品中甲硝唑、替硝唑、奥硝唑、罗硝唑、二甲硝咪唑、塞克硝唑残留量测定方法 高效液相色谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1626---2005进出口肉及肉制品中甲硝唑、替硝唑、奥硝唑、罗硝唑、二甲硝咪唑、塞克硝唑残留量测定方法‧高效液相色谱法Determination of metronidazole , tinidazole , ornidazole ,ronidazole,dimetridazole and secnidazole residues in meat and meat productsfor import and export-HPLC2006-02-01实施2005-08-18 发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T 1626—2005前言本标准的附录 A为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国河北出人境检验检疫局。本标准主要起草人：王凤池、马振栋、郭春海、吕红英、艾连峰。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。1 SN/T 1626—2005进出口肉及肉制品中甲硝唑、替硝唑、奥硝唑、罗硝唑、二甲硝咪唑、塞克硝唑残留量测定方法高效液相色谱法1范围本标准规定了肉及肉制品中罗硝唑、二甲硝咪唑及其共同的代谢物、替硝唑、奥硝唑、塞克硝唑、甲硝唑7种硝基咪唑残留量的高效液相色谱测定方法。本标准适用于鸡肉、猪肉中罗硝唑、二甲硝咪唑及其共同的代谢物、替硝唑、奥硝唑、塞克硝唑、甲硝唑残留量的测定。2样品处理将实验室样品用绞肉机全部绞碎。样品量太大时从每块样品上取代表性的部分，然后全部绞碎，混合均勾后，分为两份，一份进行测定，另一份装人密闭容器内，一18℃冷冻避光保存。3测定方法3.1方法提要试样中的硝基咪唑残留用乙酸乙酯提取，通过SCX柱净化后，用配有紫外检测器的高效液相色谱仪测定，外标法定量。3.2试剂和材料除另有规定外,所用试剂均为 HPLC级,水为高纯水。3.2. 1乙腈。3. 2. 2甲醇。3.2.3丙酮。3.2. 4乙酸乙酯。3.2.5浓盐酸：优级纯。3.2.6冰乙酸：优级纯。3.2.7氨水：分析纯。3.2.8盐酸：0.1mol/L,吸取浓盐酸0.83mL，用水定容于100 mL容量瓶中。3.2.9乙酸-乙酸乙酯（5+95）:5mL冰乙酸用乙酸乙酯定容至100 mL。3.2.10氨水-乙(5+95):5mL氨水用乙腈定容至100mL。3. 2. 110.45 μm滤膜。3. 2. 127种硝基咪唑标准品:纯度≥98.0%,其中罗硝唑和二甲硝咪唑的代谢物为 1-甲基-2-羟甲基-5-硝基咪唑（简写为 DMZOH)。3.2.13标准储备液：分别称取每种硝基咪唑标准品各10 mg(准确至0.1 mg),用甲醇溶解,并分别定容到10 mL棕色容量瓶中,混匀,该溶液的浓度为 1 mg/mL。避光一18℃冷冻保存，保存期为 1 年。3.2.14混合标准中间液I：取每种标准储备液各 1mL,移人100mL棕色容量瓶中，用甲醇定容。该溶液浓度为10 μg/mL。避光一18℃冷冻保存,保存期为1 年。3.2.15混合标准中间液Ⅱ：取1 mL混合标准中间液 I于100 mL棕色容量瓶中，用水稀释至刻度。该溶液浓度为100 ng/mL。置于冰箱中1℃～4℃下避光保存，保存期为3个月。 SN/T 1626—2005标准工作液：根据需要，吸取一定量的混合标准中间液Ⅱ，用水稀释至所需浓度，现用现配。3. 2. 163.2.17SCX固相萃取柱：5 mL 乙酸-乙酸乙酯(5+95)预洗。空白实验有杂质干扰时，依次用 10 mL氮水-乙腈(5+95）、10 mL 0.1mol/L盐酸、20 mL水和3mL甲醇、5mL乙酸-乙酸乙酯(5+95)预洗。整个过程应保持 SCX柱湿润，最后柱上保留约 1 cm溶液，关闭活塞，柱上端连接储液器，贮液器底部塞小块脱脂棉，备用。3.3仪器和设备3.3.1高效液相色谱仪，配有紫外检测器。3.3.2超声波清洗器。3.3.31旋涡振荡器。3.3. 4旋转蒸发器。氮吹仪。.6均质器。3. 3.7离心机：最大转速5000r/min。3.3.8固相萃取装置。3. 4测定步骤3.4.1提取称取5g(准确至0.01g)样品于50 mL离心管中，加人20mL乙酸乙酯，均质1 min后，超声提取5min,再以3000 r/min的速度离心10 min，取上清液转移至鸡心瓶中。再用20mL乙酸乙酯重复提取一次,合并上清液于同一鸡心瓶中。3.4.2净化将提取液于 40℃下旋转蒸发至近干(不能全部蒸干）,用 5mL乙酸-乙酸乙酯(5十95)溶解，将溶液转移到预洗过的 SCX柱上的贮液器中，再用5mL乙酸-乙酸乙酯（5十95)洗鸡心瓶，洗液一并转移到SCX柱上的贮液器中,打开活塞，以 2 mL/min 流速滴下。依次用2.5 mL丙酮,