NY_T 1846-2010食用菌菌种检验规程.pdf

ICS 65.020B 61NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 1846—2010食用菌菌种检验规程Code of practice for spawn testing of edible mushroom2010-05-20 发布2010-09-01实施中华人民共和国农业部发布Ls. NY/T 1846--2010前言本标准由农业部种植业管理司提出并归口。本标准起草单位：中国农业科学院农业资源与农业区划研究所、农业部微生物肥料和食用菌菌种质量监督检验测试中心。本标准主要起草人：张金霞、黄晨阳、高巍、郑素月、张瑞颖、胡清秀、陈强一 NY/T 1846--2010食用菌菌种检验规程1范围本标准规定了各类食用菌菌种质量的检验内容和方法以及抽样、判定规则等要求。本标准适用于各类食用菌各级菌种质量的检验。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的，凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 191包装储运图示标志(GB/T 191—-2008 ISO.780:1997,MOD)GB/T 4789.28食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂GB 19169黑木耳菌种GB 19170香菇菌种GB 19171双孢蘑菇菌种GB 19172平菇菌种GB/T 23599草菇菌种NY/T 528--2002食用菌菌种生产技术规程NY 862杏鲍菇和白灵菇菌种，食用菌菌种真实性鉴定NY/T 1097酯酶同工酶电泳法NY/T 1730）食用菌菌种真实性鉴定ISSR法NY/T 1742食用菌菌种通用技术要求NY/T 1743食用菌菌种真实性鉴定RAPD法NY/T 1845—2010食用菌菌种区别性鉴定拮抗反应3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3. 1送检样品submitted sample送到菌种检验机构待检验的、达到规定数量的样品。3. 2试验样品working sample在实验室中从送检样品中分出的部分样品，供测定某一检验项目之用。4检验内容和方法4.1感官检验4.1.1 母种容器用米尺测量试管外径和管底至管口的长度，肉眼观察试管有无破损。棉塞(无棉塑料盖)1 NY/T 1846---2010手触是否干燥；肉眼观察是否洁净，对着光源仔细观察是否有粉状物；松紧度以手提起棉塞或拔出棉塞的状况检查；棉塞透气性和滤菌性以观察塞入试管口内或露出试管口外棉塞的长度检查。斜面长度用米尺测量斜面顶端到棉塞的距离。斜面背面外观肉眼观察培养基边缘是否与试管壁分离，同时观察培养基的颜色。母种外观其他各项肉眼观察菌丝有无其他色泽及异常，有无螨类，必要时用5倍放大镜观察。气味在无菌条件下拔出棉塞，将试管口置于距鼻 5cm～10 cm处，屏住呼吸，用清洗干净、酒精棉球擦拭过的手在试管口上方轻轻煽动，顺风鼻闻。4.1.2原种和栽培种4. 1.2. 1容器肉眼观察有无破损棉塞无棉塑料盖）按照的要求。培养基上表面距瓶(袋)口的距离用米尺测量。接种量原种用米尺测量接种块大小，栽培种检查生产记录。杂菌菌落肉眼观察，必要时用5倍放大镜观察。菌种外观其他各项肉眼观察菌丝有无其他色泽及异常，有无螨类，必要时用5倍放大镜观察。气味按照的要求。4.2菌丝微观特征检验4.2.1插片培养法挑取试验样品中少量菌丝分别接种于2个PDA平板上，25℃培养3d，在菌落边缘处插人无菌盖片，继续在25℃下培养2d～3d,取出盖片，盖于载玻片的水滴上，显微镜下观察。先用10倍物镜观察菌丝是否粗壮、丰满、均匀,再转到40倍物镜下观察菌丝的细微结构。需要测量菌丝粗细的可在目镜内装好测微尺，对菌丝直径进行测量。同时观察有无锁状联合、形态结构和特征。每一试检样品应检查不少于30个视野。4.2.2水封片观察法取干净载玻片，滴一滴无菌水，用无菌操作方法挑取试验样品中少量菌丝于水滴中，挑散菌丝，盖上盖玻片，先用10倍物镜观察菌丝是否粗壮、丰满、均匀，再转到40倍物镜下观察菌丝的细微结构。需要测量菌丝粗细的可在目镜内装好测微尺，对菌丝直径进行测量。同时观察有无锁状联合、形态结构和特征。每一试检样品应检查不少于30个视野4.3霉菌检验从试验样品中挑出3mm×3mm～5mm×5mm大小的菌种块,在无菌条件下接种于 PDA 培养基上，置于25℃～28℃温度下培养,5d～7d后取出,在光线充足的条件下对比观察。检查菌落是否外观2 NY/T 1846--2010均匀、边沿整齐，是否具有该菌种的固有色泽；有无绿、黑、黄、红、灰等颜色的粉状分生孢子或异常。4.4细菌检验4.4.1液体培养基检验法从试验样品中挑出 3 mm×3 mm～5 mm ×5 mm 大小的菌种块，在无菌条件下接种于 GB/T 4789.28,4.8规定的细菌营养肉汤