NY_T 3170-2017香菇中香菇素含量的测定 气相色谱-质谱联用法.pdf

ICS 67.080.20B 31NY中华人民共和国农业行业标准NY/T菇中香菇素含量的测定气相色谱一质谱联用法Determination of 1,2,3,5,6-Pentathiepane in Lentinula edodesby GC-MS2017-12-22发布2018-06-01实施中华人民共和国农业部发布 NY/T 3170—2017前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由农业部种植业管理司提出并归口。本标准起草单位：农业部食用菌产品质量监督检验测试中心（上海）、上海市农业科学院农产品质量标准与检测技术研究所。本标准主要起草人：周昌艳、白冰、周佳欣、唐庆九、邢增涛、邵毅、刘海燕。I NY/T3170—2017香菇中香菇素含量的测定气相色谱-质谱联用法1范围本标准规定了香菇中香菇素[Lentinulaedodes（Berk.）Pegler]含量的气相色谱-质谱测定方法本标准适用于香菇中香菇素含量的测定。本标准方法的检出限为0.1mg/kg。定量检测范围为0.25mg/kg~20.0mg/kg2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理试料用乙睛振荡提取，弗罗里硅土柱净化，以正已烷-丙酮溶液洗脱，氮吹蒸干，残余物以正已烷溶解，经气相色谱-质谱联用仪测定，外标法定量。4试剂和材料除另有说明外，使用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水。4.1乙睛（色谱纯）。4.2正已烷（色谱纯）。4.3丙酮（色谱纯)。4.4氯化钠(NaCI)。4.5正已烷-丙酮溶液（9+1)：量取50mL丙酮加人450mL正已烷中。4.6香菇素标准品：纯度≥90%。4.7香菇素标准储备溶液：称取香菇素标准品11.1mg(精确至0.1mg)加10mL正已烷溶解，全部转移到20mL试管中，超声15min，将溶液移人100mL容量瓶中，残余标准物质再次加人正已烷，重复上述步骤4次后，将100mL容量瓶定容至刻度线，配制成浓度为100ug/mL的标准储备液。该储备液置于0℃～4℃避光储存，有效期3个月。4.8香菇素标准工作溶液：分别吸取适量的标准储备溶液，用正已烷稀释为1μg/mL、2μg/mL、5ug/mL、10μg/mL、20ug/mL的标准工作液。该标准工作液置于o℃～4℃避光条件下，有效期1个月。4.9弗罗里硅土柱(Florisil)：3mL,500mg或相当者。5仪器和设备5.1气相色谱-质谱联用仪：配有电子轰击电离源(EI)。5.2分析天平：感量士0.0001g和士0.01g。5.3回旋式振荡器。5.4组织捣碎机。5.5抽滤装置。 NY/T3170—20175.6氮吹仪。5.7固相萃取装置。5.8涡旋混合器。6试样制备鲜样：分取500g，切碎，用组织捣碎机匀浆后，置于密闭容器中。在一20℃～一16℃条件下冷冻保存。干样：分取约200g，机械粉碎，过380um筛，混匀置于密闭容器中室温保存。7分析步骤7.1提取7.1.1鲜样的提取：称取试料5g(精确至0.01g)置于100mL具塞锥形瓶中，准确加人10mL乙腈，在回旋式振荡器上以150r/min转速振摇45min后，过滤，将滤液至事先加人4g氯化钠的50mL具塞量筒中，剧烈震荡1min，静置15min以上待分层。吸取2mL上层有机相于10mL烧杯中，50℃氮吹至近干，加人2mL正已烷溶解，待净化。7.1.2干样的提取：称取试料0.5g(精确至0.01g)置于100mL具塞锥形瓶中，加人4.5mL水混匀，15min后准确加人10mL乙腈，其他同7.1.1。7.2净化将弗罗里硅土柱用3mL正已烷-丙酮溶液、2mL正已烷依次淋洗，当溶剂液面到达吸附层表面时，立即倒入上述待净化溶液，用15mL刻度离心管接收洗脱液，用3mL正已烷-丙酮溶液重复冲洗2次，将装有洗脱液的离心管置于氮吹仪上，50℃氮吹至近干，用2mL正已烷定容，在涡旋混合器上混匀，移入2mL进样瓶中，待测。7.3测定7.3.1色谱参考条件色谱参考条件如下：色谱柱：HP-5MS毛细管柱，30mX0.25mmX0.25μm，或等效色谱柱；a)1b)进样口温度：220℃；c)柱温箱温度：初始温度50℃保持1min，以10℃/min升温至280℃保持5min，后运行1mind)载气：氨气，纯度99.99%；e)载气流速：1.0mL/min；f)进样方式和进样量：不分流进样，进样量1μL。7.3.2J质谱参考条件a)离子源温度：220℃；b)[四级杆温度：150℃；c)传输线温度：280℃；d)离子源：EI源；e)扫描模式：选择