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elisa方法常见错误结果的分析 elisa方法广泛应用于各种抗剂和抗剂试验。但ELISA测定中影响因素较多, 而且其操作中有一定的技术要求, 在临床检验中如果处理不当, 会出现一些错误结果 (即假阳性或假阴性结果) 。引起ELISA测定错误结果的原因主要有:①标本因素;②操作因素;③试剂因素。本文主要就标本因素和操作因素对ELISA测定的影响做如下讨论。 1 血清相同标本 血清是最常用的ELISA标本, 血浆一般可视为与血清同等的标本。标本引起的假阳性和假阴性结果主要是干扰性物质所致, 分为内源性干扰物质和外源性干扰物质两种。 1.1 检测结果影响因素 有人认为大约40%的人血清标本中含有非特异性干扰物质, 可以不同程度影响检测结果。常见的干扰物质有:类风湿因子、补体、嗜异性抗体、嗜靶抗原自身抗体、医源性诱导的抗鼠Ig (s) 抗体、交叉反应物质和其它物质等。 1.1.1 fc段直接结合的问题 人血清中IgM、IgG型类风湿因子 (RF) 可以与ELISA系统中的捕获抗体及酶标记二抗的FC段直接结合, 从而导致假阳性。解决该情况的办法是:①用F (ab) 2替代完整的IgG;②标本用偶联有热变性 (63℃, 10 min) IgG的固相吸附剂处理 (将热变性IgG加入到标本稀释液中同样有效) ;③检测抗原时, 可用2-巯基乙醇等加入到标本稀释液中, 使RF降解。 1.1.2 假