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细菌感染病原学诊断细菌分类及命名;第一节 临床标本采集及处理;（二）无菌采集，避免污染 （三）不同病菌、不同疾病、采集不同标本 如: 伤寒 第一周 取血 第二、三周 取大、小便、骨髓 （四）根据检测项目要求，应采集足量 （五）安全采集：避免标本污染；防止传播和自身感染 （六）标本应注明：姓名、年龄、性别、采集日期、临床诊断、检测项目;二、标本处理原则 　　1、床旁接种 　　2、立即送检：一般在2小时内 　　3、保温（低温、嗜温）送检 　　4、保护送检：避免打翻、破流、污染、漏气。 　　5、安全送检：烈性传染病标本，专人送检。;三、标本检查方法 1、直接显微镜检测 2、病原体分离培养和鉴定 3、病原体特异性抗原检测 4、血清学检测（特异性抗体检测） 5、病原体核酸检测;第二节 细菌形态学检查;（一）不染色标本检查法 主要用于观察生活状态下微生物某些形态特点及运动性 ?常用方法有压滴法和悬滴法 如:用压滴法观察霍乱弧菌“鱼群样运动” 悬滴法观察霍乱弧菌“穿梭样运动” 如在同一方法制作另一标本中加入效价≥1:64霍乱多价血清则穿梭样运动停止并发生凝集,则为制动试验(+);悬滴法制片步骤;暗视野检查 用于检查活菌、螺旋体及其动力 缺点是不能观察结构，不能鉴别染色性;（二）染色标本检查法 1、常用染料有 (1)碱性染料：显色离子带正电，易及带负电病原体结合，如碱性复红、结晶紫、美兰。 (2)酸性染料：显色离子带负电，易与带正电病原体结合，如伊红、刚果红。 (3)复合染料：又称中性染料，是酸、碱性染料复合物，如伊红美兰、姬姆萨染料、荧光染料。;2、染色标本检查;单染色:只用一种染料进行染色.;复染色:用两种或两种以上染料进行 染色;革兰染色法步骤:;15;结果: 染成紫色称革兰染色阳性 G+ 染成红色称革兰染色阴性 G- ; 　　G+ G-;意义 : (1)鉴别细菌，有助于进一步鉴定。对有特殊形态结构及排列方式病原菌可进行初步鉴定。 (2)指导临床用药 (3)了解细菌致病性 ;19;特殊染色法:;21;22;23;第三节 细菌分离培养 培养基： ★　概　念：是由人工配制适合微生物生长繁殖使用混合营养基质。 ★　应有成分： 水份 　碳源　氮源　能源　无机盐　生长因子;培养基组成成分: 1、营养物质：碳源、氮源、无机盐、生长因子等 （1）蛋白胨：是最常用成分之一，提供细菌生长繁殖所需氮源；含胨、多肽和多种氨基酸。其吸水性强，应密封干燥保存。 （2）肉汤：提供细菌生长繁殖所需氮源和碳源及少量生长因子。;（3）牛肉浸膏：由肉浸液经长时间加热浓缩而制成。糖类在加热过程中被破坏，所以其营养价值低于肉浸液，常用于制备培养基。 （4）糖类、醇类：为细菌生长提供碳源和能源。除葡萄糖、蔗糖主要作为碳源和能源基本成分外，其他糖类和醇类主要用于鉴定细菌所做发酵反应。;（5）血液：血液中既含有蛋白质、多种氨基酸、糖类、无机盐类等营养物质，又能提供辅酶（如V因子）、血红素（X因子）等特殊生长因子。;（6）无机盐类：提供细菌生长各种元素，如：钾、钠、铁、硫等。用于制备培养基无机盐类有多种，其中最常用有氯化钠和磷酸盐，前者可维持酶活性、调节菌体内外渗透压，后者是细菌良好碳源并具缓冲作用。;（7）鸡蛋和动物血清:虽然不是构成培养基基本成分,但却是某些细菌生长所必需营养物质,所以仅用于制备一些特殊培养基。 （8）生长因子：是细菌生长所必需，但需要量很小。在制备培养基时，常加入维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等生长因子。;2.凝固物质 制备固体培养基时，需在液体中加入凝固物质，最常用凝固物质为琼脂，特殊情况下也可用明胶、卵白蛋白、血清等。 3.抑制剂和指示剂 它们并不是细菌生长繁殖所必需物质，而是由于选择、鉴定及判断结果需要。;（1）抑制剂：在制备培养基时，加入一定种类抑制剂，目在于抑制非检出菌生长，以利于检出菌生长。常用抑制剂有胆盐、煌绿、亚硫酸钠、亚硒酸钠及一些染料和某些抗生素。;（2）指示剂：便于观察细菌是否利用和分解培养基中糖、醇类。常用有酚红、中性红、甲基红、溴甲酚紫、中国蓝等酸碱指示剂。美蓝常用作氧化还原指示剂。;指 示 剂;★　种　类：;(二)培养基种类 1.基础培养基 含有细菌基础生长所需基本营养成分，主要成分是肉汤和蛋白胨。广泛用于细菌和真菌检验，也是制备其他培养基基础成分。;2.营养培养基 在基础培养基中加入葡萄糖、血液、生长因子等特殊成分，供营养要求较高细菌和需要特殊生