RNA干扰EGFR基因对卵巢癌顺铂耐药细胞凋亡的影响的开题报告.docxVIP

RNA干扰EGFR基因对卵巢癌顺铂耐药细胞凋亡的影响的开题报告 一、研究背景 卵巢癌是女性常见的恶性肿瘤之一，约占女性恶性肿瘤总数的4%。顺铂是卵巢癌一线化疗药物之一，但顺铂耐药性的产生限制了其疗效。因此，探索顺铂耐药的机制并寻找有效的治疗方法具有重要意义。 EGFR基因的异常表达与多种癌症的发生、发展及化疗药物耐药性的出现密切相关。最近的研究表明，EGFR在卵巢癌细胞的增殖和转移中起重要作用。 RNA干扰技术是一种新型的基因沉默技术，能够精确靶向抑制某种基因的表达，因此被广泛应用于治疗各种恶性肿瘤。但是，目前对RNA干扰EGFR基因对卵巢癌顺铂耐药细胞凋亡的影响还缺乏实验性证据。 二、研究目的 本研究旨在探讨RNA干扰EGFR基因对卵巢癌顺铂耐药细胞凋亡的影响，为治疗卵巢癌提供新的思路和方法。 三、研究方法 1. 细胞培养 选取卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780/DDP，采用离心法获取细胞，放入无菌的96孔板内，用DMEM（含10%胎牛血清）培养至密度达到70-80%。 2. 转染EGFR-siRNA 根据EGFR基因序列设计相应的siRNA序列。将siRNA转染至A2780/DDP细胞，转染完成后，取出细胞进行处理。 3. MTT实验 MTT实验通过测定细胞的代谢活性来评估细胞凋亡。MTT试剂稳定在细胞内，可以被还原为紫色形成形成沉淀。紫色沉淀可以用DMSO溶解。通过分析DMSO溶解液中的吸光值来确定细胞的凋亡率。 4. Western blot实验 Western blot是一种新型的蛋白质检测技术，可以检测EGFR基因表达水平和相关蛋白的表达水平。 四、研究意义 通过本研究，我们可以更深入地了解EGFR在卵巢癌发生、发展和顺铂耐药性中的作用，并能够为治疗卵巢癌提供新的思路和方法。