细胞生物学(第五版)-第6章-蛋白质分选与膜泡运输.pptxVIP

细胞生物学（第5版） 第6章 蛋白质分选与膜泡运输第一节 细胞内蛋白质的分选一、信号假说与蛋白质分选信号细胞质的游离核糖体产生非分泌蛋白，内质网附着核糖体产生分泌蛋白。核糖体没有结构差异，假设差异存在于蛋白质本身，提出“信号假说”。信号假说：分泌蛋白可能携带N端短信号序列，一旦该序列从核糖体翻译合成，结合因子和蛋白结合，指导其转移到内质网膜，后续翻译过程将在内质网膜上进行。现在已知，信号假说是解释分泌性蛋白在糙面内质网上合成的重要理论，该过程是包括蛋白质N端的信号肽、信号识别颗粒和内质网膜上信号识别颗粒的受体（又称停泊蛋白）等因子共同协助完成的。（一）蛋白质转移到内质网合成涉及以下成分信号肽：信号肽位于蛋白质的N端，一般由16-26个氨基酸残基组成，其中包括信号肽疏水核心区、N端和C端等3部分；原核细胞某些分泌性蛋白的N端也具有信号序列。值得注意的是，信号肽似乎没有严格的专一性。信号肽的一级结构序列信号识别颗粒:一种核糖核蛋白复合体，由6种不同蛋白质和一个7S小RNA分子构成。SRP含有2种结构域，即信号肽识别结构域和核糖体结合结构域，其中信号肽识别结构域中的p54蛋白是一种包含成簇Met残基的GTP酶，Met侧链与信号肽的疏水核心结合信号识别颗粒（SRP）的结构示意当SRP与信号肽结合后，核糖体结合结构域中的p9和p14蛋白复合体阻断新生肽链的翻译。SRP通常存在于细胞质基质中，等待信号肽从多核糖体上延伸暴露出来，SRP既可与新生信号肽序列和核糖体大亚基结合，又可与内质网膜上SRP受体结合，指导新生多肽及核糖体和mRNA附着到内质网膜上。信号识别颗粒的受体（又称停泊蛋白），与SRP特异结合，存在于内质网膜上，为异二聚体。 体外非细胞系统蛋白质合成的实验证实，在分泌性蛋白合成过程中信号肽、信号识别颗粒和停泊蛋白之间的关系如下表所示：信号肽酶 内质网腔面上蛋白水解酶，负责切除并快速降解新生多肽的N端信号肽序列。 移位子 由3-4个Sec61蛋白构成的通道，每个Sec61由3条肽链组成。内在停止转移锚定序列 和内在信号锚定序列 与内质网膜的亲合力很高，阻止肽链继续进入网腔，成为跨膜蛋白。开始转移序列和停止转移序列的数目决定多肽跨膜的次数 （二）信号肽与共翻译转运共翻译转运：分泌蛋白向rER腔内的转运是同蛋白质翻译过程偶联进行的，这种蛋白在信号肽引导下边翻译边跨膜转运的过程称为共翻译转运。可溶性蛋白的合成与转运过程跨膜蛋白的合成与转运过程1.可溶性蛋白的合成与转运过程① 核糖体组装、细胞质中翻译起始,形成信号肽；② 信号肽与SRP结合，肽链合成暂时停止；③ SRP与受体结合，核糖体附着到内质网的移位子上；④ SRP释放与移位子通道打开； 分泌性蛋白的合成与跨越内质网膜的共翻译转运图解⑤ 信号肽被信号肽酶切除;⑥ 肽链开始延伸并不断向内腔运输（共转运）；⑦ 核糖体大小亚基解离，肽链延伸终止;⑧ 释放合成的蛋白到内质网的腔，并完成蛋白折叠。 分泌性蛋白的合成与跨越内质网膜的共翻译转运图解引导新生肽链穿过内质网膜移位子的信号肽可视为开始转移序列。肽链中还可能存在某些内在序列与内质网膜有很强的亲和力使之结合在脂双层中，这段序列不再转入内质网中。内在信号锚定序列：位于新生肽链内部的疏水序列，既是信号序列，又是肽链跨膜锚定在脂双层中的序列。内在停止转移锚定序列：位于新生肽链内部的疏水序列，既是肽段终止转移，又是肽链跨膜锚定在脂双层中的序列。多次跨膜蛋白：含有多个SA和多个STA的肽链将成为多次跨膜蛋白。跨内质网膜肽段的取向：一般而言，带正电荷氨基酸残基多的一端，或带正电荷氨基酸残基多的一侧，朝向细胞质基质一侧（外侧）。2.跨膜蛋白的合成与转运过程转运特点： ①信号肽（开始转移序列）分 N端信号肽和内部信号肽（信号序列位于肽链内部）两种。 ②停止转移锚定序列，即肽链上一段与内质网膜结合力很高的序列，在过内质网膜时，这段序列与双脂层结合后不再进入内质网腔，具有终止穿膜转运的作用。 如果一种多肽只有N端信号序列而没有停止转移锚定序列，这种多肽合成后一般进入内质网腔中；如果一种多肽的停止转移锚定序列位于多肽的内部，这种多肽最终会成为内质网膜的跨膜整合蛋白。在r ER合成的整合膜蛋白根据拓扑学特征大体可分为4类，他们的共同特点是多肽链的20-25个疏水氨基酸残基形成跨膜ɑ螺旋，不同点在于是否有N端可切割的ER信号序列，定位方向或跨膜次数也会有所不同内质网膜整合蛋白的拓扑学类型3.导肽与后翻译转运线粒体、叶绿体和过氧化物酶体的蛋白质的信号序列特称为导肽（，其基本的特征是蛋白质在细胞质基质中的游离核糖体上合成以后再转移到这些细胞器中，因此称这种翻译后再转运的方式为后翻译转运。基本特征：这种转运方式在蛋白质跨膜过程中需要ATP，使多肽去折叠；还需要一