DB35T 1499-2015水产养殖环境中杆菌肽、粘菌素及维吉尼霉素残留量的测定.docxVIP

ICS 13.060.50 Z 16 福 建 省 地 DB35 方 标 准 DB35/T 1499—2015 水产养殖环境中杆菌肽、粘菌素及 维吉尼霉素残留量的测定 Determination of Bacitracin, Colistin and Virginiamycin residues in aquaculture environment 2015-06-01 实施2015- 2015-06-01 实施 福建省质量技术监督局 发 布 I DB35/T 1499—2015 前 言 本标准按照GB/T 1.1—2009《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写》给出的规则编写。 本标准由福建省海洋与渔业厅提出并归口。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准起草单位： 福建省水产研究所、福建省渔业环境监测站、农业部渔业产品质量监督检验测试 中心(厦门)。 本标准主要起草人：罗冬莲、罗方方、钱卓真、汤水粉、叶玫、吴成业。 1 DB35/T 1499—2015 水产养殖环境中杆菌肽、粘菌素及维吉尼霉素残留量的测定 警告： 使用本标准的人员应有正规实验室工作的实验经验， 应熟知下述化学处理操作和仪器操作安 全。本标准并未指出所有可能的安全问题。使用者有责任采取适当的安全和健康措施， 并保证符合国家 有关法规规定的条件。 1 范围 本标准规定了水产养殖环境(水体和沉积物) 中杆菌肽、粘菌素及维吉尼霉素M1残留量测定的高 效液相色谱-串联质谱法。 本标准适用于水产养殖环境(水体和沉积物)中杆菌肽、粘菌素及维吉尼霉素M1残留量的检测。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件， 仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682-2008 分析实验室用水规格和试验方法 GB 17378.3-2007 海洋监测规范 第3部分：样品采集、贮存与运输 3 原理 水样经过滤、酸化后， 采用固相萃取方法富集和净化； 沉积物经甲醇-柠檬酸-磷酸氢二钠溶液超声 提取，乙二胺四乙酸二钠络合除杂，甲基异丁基甲酮萃取，固相萃取柱富集净化；高效液相色谱-串联 质谱法测定，基质匹配标准曲线法定量。 4 试剂和材料1) 本标准所用试剂除非另有规定，使用的试剂为分析纯，水为GB/T 6682-2008规定的一级水。 4.1 硫酸粘菌素标准品：纯度≥78.3%。 4.2 杆菌肽标准品：纯度≥77.0%。 4.3 维吉尼霉素 M1 标准品： 纯度≥95.0%。 4.4 甲醇：色谱纯。 4.5 甲酸：优级纯。 4.6 正己烷：色谱纯。 4.7 乙腈：色谱纯。 4.8 一水柠檬酸。 4.9 十二水磷酸氢二钠。 4.10 甲基异丁基甲酮：色谱纯。 1) 称取标准品的质量是按纯度修正过的质量。 2 DB35/T 1499—2015 4.11 乙二胺四乙酸二钠。 4.12 0.1 mol/L 的柠檬酸溶液：取一水柠檬酸(4.8) 21.01 g，用水溶解并稀释至 1000 mL。 4.13 0.2 mol/L 的磷酸氢二钠溶液： 取十二水磷酸氢二钠(4.9) 71.63 g，用水溶解并稀释至 1000 mL。 4.14 柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲溶液： 取 0.1 mol/L 的柠檬酸溶液(4.12) 1000 mL 和 0.2 mol/L 的磷酸氢 二钠溶液(4.13) 625 mL ，混合均匀。 4.15 甲醇-柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲溶液： 取甲醇(4.4) 300 mL 和柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲溶液(4.14) 400 mL ，混合均匀。 4.16 0. 1%的甲酸甲醇溶液：取甲酸(4.5) 1 mL，用甲醇(4.4) 稀释至 1000 mL。 4.17 0. 1%的甲酸水溶液：取甲酸(4.5) 1 mL，用水稀释至 1000 mL。 4.18 定容液：取 0. 1%甲酸水溶液(4.17) 80 mL 和乙腈(4.7) 20 mL ，混合均匀。 4.19 0. 1%甲酸乙腈溶液：取甲酸(4.5) 1 mL，用乙腈(4.7)稀释至 1000 mL 。 4.20 Oasis HLB 固相萃取柱： 500 mg/6 mL；或相当者。 4.21 Oasis HLB 固相萃取柱： 200 mg/6 mL；或相当者。 4.22 标准储备液： 准确称取硫酸粘菌素(4.1)、杆菌肽(4.2)各 20 mg (精确至 0.1 mg)于 100 mL 棕色容量瓶中， 用 0. 1%的甲酸水溶液(4.17) 溶解并稀释至刻度， 配制