DB35T 1513-2015柑橘属果实中柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷的测定 高效液相色谱法.docxVIP

ICS 11.120.10 C 15 福 建 省 地 DB35 方 标 准 DB35/T 1513—2015 柑橘属果实中柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷的 测定 高效液相色谱法 Determination of Content of Narigin, Hesperidin and Neohesperidin in citrus fruits by HPLC 2015-06-26 发布 2015-09-26 实施 福建省质量技术监督局 发 布 I DB35/T 1513—2015 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写》给出的规则起草。 本标准由福建省农业科学院提出。 本标准由福建省农业厅归口。 本标准起草单位：福建省农科院中心实验室 本标准主要起草人：潘葳、刘文静、罗钦。 1 DB35/T 1513—2015 柑橘属果实中柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷的测定 高效液相色谱法 1 范围 本标准规定了芸香科柑橘属植物果实中柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷的高效液相色谱测定方法。 本标准适用于橘、柑、柚、橙、柠檬、香橼或称枸橼(佛手)等芸香科柑橘属植物果实中柚皮苷、 橙皮苷和新橙皮苷的测定。 本标准方法测定柑橘属植物鲜基中柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷含量的定量限均为0.05 μg/g，检出限 均为0.016 μg/g；柑橘属植物干基中柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷含量的定量限均为2.5 μg/g，检出限均为 0.76 μg/g。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件， 仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682-2008 分析实验室用水规格和试验方法。 3 原理 试样中的柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷用甲醇提取， 提取液离心后， 取上清液， 经微孔滤膜过滤， 高 效液相色谱-紫外检测法测定，外标法定量。 4 试剂和材料 除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水应符合GB/T 6682-2008中一级水的要求。 4.1 甲醇(CH4O)：色谱纯。 4.2 乙腈(C2H3N)：色谱纯。 4.3 冰醋酸(C2H4O2 )。 4.4 柚皮苷标准品(CAS 520-26-3)：纯度≥97% (质量分数)。 4.5 橙皮苷标准品(CAS 10236-47-2)： 纯度≥98% (质量分数)。 4.6 新橙皮苷标准品(CAS 13241-33-3) ：纯度≥98% (质量分数)。 4.7 甲醇(CH4O)。 4.8 0.5%乙酸溶液：移取 5.0 mL 冰醋酸(4.3)，用水稀释并定容至 1000 mL。 4.9 流动相：将 20 体积乙腈(4.2)与 80 体积 0.5%乙酸溶液(4.8) 混合。使用前经微孔滤膜(5.9) 过滤并脱气。 4.10 柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷混合标准贮备液(1.0 mg/mL) ：准确称取柚皮苷(4.4) 、橙皮苷(4.5) 和新橙皮苷(4.6)标准品各 10 mg (精确至 0.1 mg)，于 10 mL 容量瓶中，用甲醇(4.1)溶解并稀释 至刻度，配制成浓度为 1.0 mg/mL 的柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷混合标准贮备液。 2 ℃~8 ℃保存，有 效期 2 个月。 2 DB35/T 1513—2015 4.11 柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷混合标准工作液： 分别准确移取 0.05 mL、0.5 mL、5.0 mL 、10.0 mL、 25.0 mL 柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷混合标准贮备液(4.10) 于不同的 50 mL 容量瓶中，用流动相溶液 (4.9)稀释并定容至刻度，摇匀，得到不同浓度的柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷混合标准工作溶液(质 量浓度分别为 1 μg/mL 、10 μg/mL 、100 μg/mL 、200 μg/mL 、500 μg/mL) ，即配即用。 5 仪器和设备 5.1 高效液相色谱仪：配有紫外检测器或二极管阵列检测器。 5.2 电子天平：感量 0.1 mg。 5.3 鼓风干燥箱：温度可控。 5.4 高速万能粉碎机：转速 24 000 r/min ，或相当的设备。 5.5 组织捣碎机：转速 12 000 r/min ，或相当的设备。 5.6 超声波清洗器：超声波频率 40 kHz ，或相当的设备。 5.7 离心机型号 1：体积 50 mL，转速不低于 4 000r/min 或相当的设备。 5.8 离心机型号 2：体积 2 mL，转速不低于 10 000 r/min 或相当的设备。 5.9 微孔滤膜： 0.22 μm，直径 25 mm 的聚砜膜或相当者。 5.10