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春小麦高分子量谷蛋白亚基组成与分子标记研究的开题报告
一、研究背景与意义
小麦是我国及世界上最重要的农作物之一,而小麦的品质主要由其谷蛋白组分决定。谷蛋白分为硬质谷蛋白和软质谷蛋白两类,其中硬质谷蛋白主要负责小麦面筋的形成,对于面食品的品质有着至关重要的作用。而硬质谷蛋白又分为高分子量谷蛋白亚基和低分子量谷蛋白亚基两类,其中高分子量谷蛋白亚基的结构和数量对于小麦面筋的形成和品质有着直接的影响。
因此,研究小麦高分子量谷蛋白亚基组成及其分子标记,对于探索小麦品质形成的规律,筛选和培育优良小麦品种具有重要的现实意义。
二、研究内容和技术路线
1.研究内容
本研究旨在探究春小麦高分子量谷蛋白亚基组成及其分子标记,具体包括以下几个方面:
(1)利用磷酸盐缓冲液溶液(PBS)和尿素-SDS- PAGE电泳技术分离小麦高分子量谷蛋白亚基。
(2)采用质谱技术鉴定小麦高分子量谷蛋白亚基的分子量和基本氨基酸组成。
(3)利用LED光谱、HPLC等方法测定小麦高分子量谷蛋白亚基的结构特征和含量。
(4)利用PCR技术筛选出小麦高分子量谷蛋白亚基的分子标记,并通过基因克隆和表达鉴定,进一步探究其在小麦品质形成中的作用。
2.技术路线
(1)样品准备和谷蛋白提取:采集不同春小麦品种成熟种子,将其磨成粉末,加入PBS缓冲液和尿素-SDS缓冲液进行粗提液的制备。
(2)电泳分离:采用尿素-SDS- PAGE电泳技术分离小麦高分子量谷蛋白亚基,利用LED光谱技术测定其结构特征。
(3)质谱鉴定:采用MALDI-TOF/TOF-MS技术对分离出来的高分子量谷蛋白进行鉴定,得到其分子量和基本氨基酸组成。
(4)分子标记筛选和验证:通过PCR技术筛选小麦高分子量谷蛋白亚基的分子标记,并对其进行基因克隆和表达鉴定。
三、研究预期结果和意义
通过本研究,预计可以获得以下预期结果:
(1)可以对春小麦高分子量谷蛋白亚基在粗提液中的组成和含量进行研究,了解不同品种春小麦高分子量谷蛋白亚基的差异和变化规律。
(2)通过真核微量电泳和质谱鉴定,可以获得小麦高分子量谷蛋白的分子量和基本氨基酸组成的信息,进一步了解其结构和特征。
(3)利用LED光谱、HPLC等手段可以探究小麦高分子量谷蛋白的结构特征和含量。
(4)通过PCR技术筛选小麦高分子量谷蛋白亚基的分子标记,并对其进行基因克隆和表达鉴定,可以进一步探究其在小麦品质形成中的作用。
通过对春小麦高分子量谷蛋白亚基组成及其分子标记的研究,可以揭示小麦品质形成的规律,为筛选和培育优良小麦品种提供理论依据和实验基础。
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