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茂原链霉菌谷氨酰胺转胺酶初筛体系的建立及生产菌株选育的开题报告
茂原链霉菌(Streptomyces mauvecolor)是一种广泛存在于土壤中的革兰氏阳性细菌,能够产生多种生物活性产物,对医药、农药和食品工业等具有重要的应用价值。谷氨酰胺转胺酶(TAT)是一种重要的生物催化剂,具有广泛的应用前景,如合成药物、食品添加剂和农药等领域。
目前,大多数TAT的生产来源于微生物发酵。为了提高TAT的产量和纯度,本研究旨在建立一种有效的TAT筛选体系,并选育出TAT产量高、纯度好的生产菌株。
首先,本研究通过对茂原链霉菌进行营养物质优化研究,确定适宜的基础培养基和发酵条件,并对其进行初步筛选,得到了产TAT的潜力菌株。随后,对产TAT菌株进行对照实验,优化其发酵条件,包括温度、发酵时间、pH值等,以获得更高的产量和纯度。同时,引入TAT基因表达载体,通过PCR扩增等技术,构建起TAT表达系统,增加TAT的表达量。
最后,本研究将选择产TAT最高、纯度最好的菌株,并对TAT产出的特点进行深入研究。通过类柱分离、分光光度法和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱等测试技术,对TAT产物的结构和性质进行解析和分析,为其应用提供基础数据和参考。
本研究的结果将为TAT的工艺研究提供理论指导和实践基础,对于茂原链霉菌及其次生代谢产物的研究具有重要的科学意义和应用前景。
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