DB36T 1306-2020 脱毒芋原原种生产技术规程.docxVIP

ICS 65.020.20 B 30 DB36 江 西 省 地 方 标 准 DB 36/T 1306—2020 脱毒芋原原种生产技术规程 Technique regulation for pre-elite propduction of virus-free taro 2020 - 11 - 09 发布 2021 - 04 - 01 实施 江 西省 市场监督管理局 发 布 I DB36/T 1306—2020 目 次 前言 II 1 范围 1 2 规范性引用文件 1 3 术语和定义 1 4 组培准备 1 5 培养基制作 2 6 材料选取 2 7 茎尖脱毒培养 2 8 脱毒苗增殖 3 9 脱毒种茎诱导 3 10 脱毒种茎移栽 3 11 脱毒种茎贮存 3 附录 A（规范性附录） MS 培养基母液配方及配制 5 附录 B（规范性附录） 植物生长调节物质母液配制 6 附录 C（规范性附录） MS 培养基配制 7 II DB36/T 1306—2020 前 言 本文件按照 GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由江西省农业农村厅提出并归口。 本文件主要起草单位：江西农业大学、江西省江天农业科技有限公司。 本文件主要起草人：周庆红、朱强龙、单楠、孙静宇、黄英金、方加军、刘星月、张宏玉、周四红。 1 DB36/T 1306—2020 脱毒芋原原种生产技术规程 1 范围 本文件规定了脱毒芋原原种生产技术的组培准备、培养基制作、材料选取、茎尖脱毒培养、脱毒苗 增殖、脱毒种茎诱导、脱毒种茎移栽、脱毒种茎贮存等要求。 本文件适用于脱毒芋原原种的生产。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，凡注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用 于本文件。 GB/T 29378 马铃薯脱毒种薯生产技术规程 DB36/T 919 绿色食品 红芽芋 DB36/T 921 红芽芋脱毒种芋繁育技术规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 脱毒苗 Virus-free seedlings 应用茎尖组织培养技术获得的，经检测确认不带芋花叶病毒（DsMV）和黄瓜花叶病毒（CMV）的芋 试管苗。 3.2 原原种 Pre-Elite 脱毒芋在防虫网室内无菌营养基质条件下培养生产出来的、不带病毒、类病毒的用于繁殖原种的种 芋。 4 组培准备 4.1 仪器设备 4.1.1 培养基制作及灭菌设备：天平、纯水机、酸度计、高温高压蒸汽灭菌锅、电热鼓风干燥箱等。 4.1.2 无菌操作设备：超净工作台、灭菌器等。 4.1.3 培养室设备：空调、定时器、培养架、摇床、光照培养箱、人工气候室等。 4.1.4 药品储存与配制设备：冰箱、万分之一天平等。 2 DB36/T 1306—2020 4.1.5 观察分析仪器：解剖镜、显微镜、切片机等。 4.2 常用器皿及器材 4.2.1 培养器皿：试管、锥形瓶、培养皿及各类专用培养瓶。 4.2.2 盛装器皿：烧杯、试剂瓶。 4.2.3 计量器皿：量筒、容量瓶。 4.2.4 操作器材：培养基分注器、细菌过滤器、镊子、剪刀、解剖刀。 4.3 常用化学试剂 包括组培苗基本培养基所需的无机盐类、有机物类及植物生长调节物质类等。MS基本培养基成分及 母液配制参见附录A；其它常用试剂及植物生长调节物质的配制参见附录B。 5 培养基制作 5.1 培养基配制 制作培养基前需先配制MS基本培养基母液（配方及配制方法见附录A），配好后4℃保存（保存期不 超过180d）。采用附录C方法配制好固体MS培养基，组培瓶分装后放入高温高压蒸汽灭菌锅（0.1 Mpa， 121℃) 灭菌20min，取出冷却凝固后备用。 5.2 培养基配方 5.2.1 茎尖成苗培养基：MS+2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+30 g/L 蔗糖+7 g/L 琼脂粉，pH 5.8，固体培 养基。 5.2.2 组培苗增殖培养基：MS+3 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+30 g/L 蔗糖+7 g/L 琼脂粉，pH 5.8，固体 培养基。 5.2.3 脱毒种茎诱导培养基：MS+1 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+80 g/L 蔗糖+7 g/L 琼