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- 2023-08-23 发布于上海
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乳酸细菌Lc-1菌株L-乳酸发酵和提纯工艺的中期报告
一、实验目的
1.优化乳酸细菌Lc-1菌株L-乳酸发酵工艺,提高发酵效率和产量;
2.优化提纯工艺,提高提纯效率和纯度。
二、实验方法
1.发酵实验
(1)菌种培养:在MRS培养基中,以Lc-1菌株为种子菌,预培养24小时,然后移植到50 mL MRS发酵培养基中继续培养,温度为37℃,转速为200 rpm,培养48小时。
(2)发酵条件优化:通过单因素实验,选取最优的生长条件,包括初始pH值、温度、培养时间和转速等因素。
(3)发酵过程监测:在发酵过程中,通过测定发酵液的pH值、菌落计数、乳酸浓度等指标,监测发酵过程的进展。
2.提纯实验
(1)离心沉淀:将发酵液离心,收集沉淀物。
(2)络合型树脂批次吸附:将收集到的沉淀物与络合型树脂混合,静置吸附。
(3)洗脱:用NaCl溶液洗脱脂肪酸和杂质物质。
(4)洗涤和浓缩:用纯净水洗涤洗脱后的产物,再使用一系列浓缩技术,如超滤、蒸馏等技术进行浓缩。
三、实验结果
1.发酵实验结果
(1)优化初始pH值:通过单因素实验,发现初始pH值为6.0时,最利于Lc-1菌株的生长和乳酸发酵。
(2)优化温度:Lc-1菌株在37℃的温度下最适生长和乳酸发酵。
(3)优化培养时间:在48小时左右,Lc-1菌株能够达到较高的细胞生长量和乳酸产量。
(4)优化转速:转速过高,可能会导致氧气供应不足,转速过低可能会导致营养物质不足。通过单因素实验,发现200 rpm的转速最合适。
2.提纯实验结果
最终得到的纯化产物为乳酸,纯度达到了90%以上,产率为60%。
四、结论
通过实验对乳酸细菌Lc-1的发酵和提纯工艺进行了中期报告,发现Lc-1菌株在初始pH值为6.0、温度为37℃、培养时间48小时、转速为200 rpm的条件下,可获得较高的细胞生长量和乳酸产量。对于提纯工艺,通过采用络合型树脂吸附加纯净水洗涤和浓缩等多重技术,得到了90%以上的乳酸纯品,产率为60%。该方法具有良好的可行性和应用前景,对于后续深入研究乳酸细菌的进一步应用有一定的指导意义。
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