植物提取物抗氧化活性评价 薄层色谱法.pdf

中华人民共和国国家标准 GB/T XXXXX—XXXX 植物提取物抗氧化活性评价 薄层色谱法 Antioxidant capacity assessment of plant extract-Thin layer chromatography method 点击此处添加与国际标准一致性程度的标识 文稿版次选择 XXXX - XX - XX 发布 XXXX - XX - XX 实施 中华人民共和国标准化管理委员会 发 布 GB/T XXXXX—XXXX 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由江南大学提出。 本标准由中国标准化研究院归口。 本标准起草单位： 本标准主要起草人： II GB/T XXXXX—XXXX 植物提取物原料抗氧化活性评价 薄层色谱法 1 范围 本标准规定了薄层色谱联用1，1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)显色反应评估植物提取物抗氧化能力 的方法( 以槐米提取物为例，芦丁为标准) 。 本标准适用于同时评价植物性食品原料中多元抗氧化物质的抗氧化能力。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 用硅胶薄层色谱对槐米提取物的甲醇溶液进行展开，实现对其中多种抗氧化物质的色谱分离，然后 通过浸渍的方式将停留在硅胶薄层上的分离结果与 DPPH 显色反应相耦合，显色反应结果用光密度扫 描仪定量检测，检测结果以芦丁为内标加权定量计算评估槐米样品综合抗氧化能力。 4 试剂和材料 4.1 除非另有说明，在分析中所使用试剂均为分析纯，用水为GB/T 6682 规定的一级水 4.2 芦丁标准品，分析纯 4.3 甲醇，色谱纯 4.4 乙酸乙酯，色谱纯 4.5 乙酸，分析纯 4.6 DPPH ，分析纯 4.7 高压氮气，纯度99.9% 4.8 硅胶薄层板，分析型 4.9 芦丁标准溶液 a) 标准储备液：精确称取10 mg ±0.1 mg 芦丁标准品（4.2 ），溶于10 mL 甲醇（4.3 ）中。制得1 mg/mL 标准储备液，置于棕色容量瓶中，在4 ℃冰箱中恒温避光保藏,保质期1 周 b) 标准工作液：准确吸取芦丁标准储备液（4.10a ）1.0 mL，与9.0 mL 甲醇（4.3 ）混合稀释，使 该混合标准工作溶液浓度为0.1 mg/mL。芦丁标准工作液测试当天新鲜配置 4.10 DPPH 衍生液 准确称取25.0 mg DPPH(4.6) ，溶于75 mL 甲醇溶液中。DPPH 衍生液测试当天新鲜配置。 4.11 槐米提取物 1 GB/T XXXXX—XXXX 4.12 滤膜：孔径0.45 μm 4. 13 离心管：15～25 mL 5 仪器与设备 5.1 实验室常用玻璃器皿 5.2 分析天平：灵敏度0.0001 g 。 5.3 涡旋混匀器 5.4 超声清洗仪：超声频率