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uplc-msms法同时测定注射用辛芍冻干粉针中8种成分的含量 射箭注释（冷冻干粉针）是用现代红茶、灯火以及冷冷冻干燥法从现代红茶中提取出来的中药。具有活血化瘀、通经活络的功效，主要用于中风和血瘀阻络证的临床治疗。能迅速改善脑缺血动物的症状, 对脑缺血性大鼠及小鼠有明显保护作用; 增加大鼠脑血流, 改善缺血大鼠脑微循环［1 － 4］。多成分含量测定方法是中药现代化质量控制的重要手段和趋势。液质联用法由于专属性强、灵敏度高, 已经越来越多地应用于中药及其制剂的质量控制研究中［5 － 6］。为有效控制产品质量, 确保本品的临床疗效, 采用UPLC-MS /MS法建立了注射用辛芍 ( 冻干粉针) 中7 个主要成分的含量测定方法, 该方法操作简便, 快速灵敏, 重现性好, 为全面准确地控制注射用辛芍 ( 冻干粉针) 的质量提供了科学依据。 ACQUITYTM系统超高液相色谱-三重四级杆串联质谱仪 ( 包括二元梯度泵、自动进样器、柱温箱、三重四级杆质量分析器和Masslynx4. 1 质谱工作站, 美国Waters公司) 。 没食子酸 ( 批号: 110831-200803) 、芍药苷 ( 批号: 110736-200934 ) 和野黄芩苷 ( 批号: 110842-201106) 对照品购自中国食品药品检定研究院; 氧化芍药苷 ( 批号: 、芍药内酯苷 ( 批号:S37-100126) 、灯盏甲素 ( 批号:) 和苯甲酰芍药苷 ( 批号: 对照品购自中药固体制剂制造技术国家工程研究中心; 注射用辛芍 ( 冻干粉针, 贵州省药物制剂重点实验室提供, 规格: 200 mg /支, 批号: 。乙腈 ( 德国Merck公司) 、甲酸 ( 美国Tedia公司) 为色谱纯;水为超纯水; 其他试剂均为分析纯。 方法和结果 1 流动相及流场 色谱柱为WATERS ACQUITY BEH C18柱 ( 50mm × 2. 1 mm, 1. 7 μm) ; 流动相为乙腈-0. 1% 甲酸水溶液, 线性梯度洗脱程序见表1; 流速为0. 35 m L·min－ 1; 柱温为45 ℃; 进样量为1 μL。 2 正负离子同步检测 离子源电喷雾电离源 ( ESI) ; 毛细管电压3. 0 k V;离子源温度120 ℃; 去溶剂气N2, 流速650 L·h－ 1; 去溶剂气温度350 ℃; 离子源温度120 ℃; 碰撞气Ar, 流速0. 18 m L·min－ 1; 多反应离子监测 ( MRM) 模式进行正负离子同步检测; 监测离子对分别为: 没食子酸, m/z ( - ) 168. 9→125. 0; 氧化芍药苷, m/z ( - ) 495. 3→136. 9; 芍药内酯苷, m / z ( + ) 481. 3→105. 0;芍药苷, m/z ( - ) 525. 2→121. 0; 野黄芩苷, m/z ( + ) 463. 1→287. 1; 灯盏甲素, m / z ( + ) 447. 2 →271. 1;苯甲酰芍药苷, m/z ( - ) 583. 3→120. 9。 3 对照品溶液的制备 精密称取氧化芍药苷对照品6. 17 mg、灯盏甲素对照品2. 08 mg、苯甲酰芍药苷对照品10. 04 mg, 置50 m L量瓶中, 加甲醇稀释至刻度, 即得混合对照品溶液A; 精密称取没食子酸对照品6. 37 mg、芍药内酯苷对照品5. 06 mg、芍药苷对照品15. 63 mg、野黄芩苷对照品10. 42 mg, 置100 m L量瓶中, 精密加入混合对照品溶液A 10 m L置量瓶, 加甲醇稀释至刻度, 即得混合对照品溶液B。 4 供试品溶液制备 取本品内容物0. 1 g, 精密称定, 置100 m L量瓶中, 加水使溶解并稀释至刻度, 摇匀, 精密吸取该液5 m L, 置50 m L量瓶中, 加水稀释至刻度, 摇匀, 用0. 22 μm微孔滤膜滤过, 取续滤液作供试品溶液。 5 测定化合物与对照品溶液的保留时间 精密吸取混合对照品溶液B、供试品溶液各1 μL, 分别进样, 结果见图1。供试品溶液中被测定化合物与7 个对照品的保留时间相同。比较被测定成分和对照品的母离子、子离子质谱图, 两者一致, 表明本法专属性良好。 6 仪器精密度与重复性 6. 1 线性关系考察精密量取混合对照品溶液B1, 2, 4, 6, 8, 10 m L分别置于6 个25 m L量瓶中, 加甲醇定容至刻度, 摇匀, 制得6 个系列浓度线性工作液, 分别进样测定。以色谱峰峰面积 ( A) 为纵坐标, 以对照品浓度 ( C) 为横坐标进行线性回归, 得各被测成分的回