DNA提取与鉴定专业知识讲座.pptxVIP

试验指导老师 刘晓颖 张萍萍 陈彦 王剑峰 李绍飞 2023-02;生物化学大试验;生物化学大试验;试验要求;成绩评定;动物组织ＤＮＡ提取与判定;分离纯化核酸标准与要求;;DNA在细胞内分布;;DNA性质;真核生物基因组DNA分离纯化基本步骤; 　高分子质量DNA在物理上仍是易碎，在溶液中，长而弯曲DNA分子随机卷曲，并因碱基堆积力和磷酸 基团间静电排斥力变得粘滞，容易受到吸液、振荡、搅拌等引发流体剪切力作用而断裂，因此，基因组DNA容易成片断获取，但所需分子质量越大，取得难度也对应增加，大于150 kbDNA分子在常规分离办法中多被切断。 清除蛋白质常用酚、氯仿抽提，反复抽提操作对DNA链机械剪切机会较多，因此有人使用80％甲酰胺解聚核蛋白联合透析办法，可得不大于200 kbDNA片段。;猪脾脏DNA提取与判定;【试验原理】;　　核酸提取液中具有蛋白质、多糖等能够用沉淀分离法除去。 　　在核酸提取液中加入氯仿-异戊醇或氯仿-辛醇，振荡一段时间，使蛋白质在氯仿一水界面上形成凝胶状沉淀而离心除去，核酸仍留在水溶液中。;核酸都不溶于有机溶剂，可在核酸提取液中加入亲水有机溶剂（乙醇），使DNA或RNA呈絮状沉淀析出。;【试验材料】