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原位杂交技术在遗传育种中的应用 加尔特等人和约翰riham在1969年开发了原始染色体混合技术（ihsh）。30年后，基因和dna序列的位置可以建立在染色体上。从最初用同位素标记探针的原位杂交技术发展形成了包括生物素原位杂交、荧光原位杂交和基因组原位杂交结合分带技术, 逐渐形成了一系列较为完善的技术系统。本文主要介绍原位杂交技术的研究进展及其发展前景。 1 非同位素原位杂交 原位杂交 (ISH) 是利用标记探针与组织细胞或染色体的进行杂交对细胞中的待测核酸进行定性、定位或相对定量分析。当进行原位杂交时, DNA分子经过高温处理后, 双链解链产生两条单链, 温度下降, 单链会按照碱基互补配对的原则, 重新形成氢键, 恢复到原来的结构。如果两条单链的来源不同, 只要它们之间的碱基序列是同源互补或部分同源互补的, 就可以全部或部分复性, 产生分子杂交。 原位杂交技术经过30年的发展, 已经广泛地应用于动、植物遗传学的各个研究领域中。最初的原位杂交利用同位素标记探针, 虽具有灵敏度高和对单拷贝DNA序列非常有效的特点, 但也存在放射性污染的潜在危险。有些放射性同位素半衰期短, 不易储存和运输, 而且放射自显影技术检测杂交位点要求的照射时间长, 需几个周甚至几个月。为了克服这些缺点, 科学家们发明了非同位素原位杂交技术 (nonisotropic in situ hybridization