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- 2023-09-02 发布于上海
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人CD24蛋白的原核表达、分离纯化及其亲和多肽的筛选的中期报告
人CD24蛋白是一种普遍存在于各种组织和细胞类型中的糖蛋白,具有多种生物学功能。为了更好地了解其功能以及研究其在疾病中的作用,需要对其进行原核表达、分离纯化及亲和多肽的筛选。
在中期报告中,我们主要完成了以下工作:
1. 基因克隆:通过PCR扩增人CD24基因的完整编码序列,并将其克隆到原核表达载体pET-32a(+)中。
2. 原核表达:将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,诱导其表达融合蛋白,并进行SDS检测蛋白表达情况。
3. 纯化:经过细胞破碎,超声波破碎、尿素溶解蛋白等多步纯化,最终成功得到了高纯度的重组人CD24蛋白。
4. 亲和多肽筛选:产生了抗CD24多肽的克隆,使用原核表达的CD24蛋白作为抗原,筛选出具有高亲和力的抗CD24多肽。
经过以上工作,我们得到了高质量的CD24蛋白样品,并成功完成了抗CD24多肽的筛选。接下来,我们将进一步利用这些样品开展对CD24的结构与功能的深入研究。
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