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解惑练 4 PCR技术拓展应用
应 用 I :反 向P C R 测定未知D N A 区域
当D N A 的某些序列已知,而需要扩增已知序列两端的未知序列时,可采用反 向P C R 技
术 。 理:用限制性 内切核酸酶切割该D N A , 随后使用D N A 连接酶将获得的酶切产物环化,
这样就获得了已知序列两侧携带有未知序列的环状D N A 分子 。以该已知序列为模板设计一
对相反方向的特异性引物,该引物对己知序列反向,但对未知序列却是相向的,从而得以扩
增出未知序列。
应 用2 : P C R 定点突变技
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