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- 2023-09-08 发布于上海
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低氧激活非折叠蛋白反应对下咽癌FaDu细胞化疗敏感性的作用及机制的中期报告
本研究旨在探讨低氧条件下非折叠蛋白反应(UPR)对下咽癌FaDu细胞化疗敏感性的影响及相关机制。本报告为中期报告,包括实验方法、结果及初步讨论。
实验方法:
1. 下咽癌FaDu细胞的培养与处理:将FaDu细胞分别培养至对数生长期,分为正常氧(20% O2)和低氧(2% O2)组,经过1小时的预处理后,利用化学药物诱导UPR。
2. 药物诱导UPR:使用Tunicamycin和Thapsigargin分别作为ER蛋白质合成抑制剂和Ca2+泵抑制剂,诱导UPR。药物浓度和处理时间根据前期试验确定。
3. 细胞增殖实验:利用CCK-8法检测细胞存活率,观察UPR对细胞化疗敏感性的影响。
4. Western Blot:检测UPR信号通路相关蛋白表达水平的变化,包括IRE1、PERK、ATF6、eIF2α、CHOP等。
结果及初步讨论:
1. 药物Tunicamycin和Thapsigargin的浓度和处理时间已经确定;
2. 低氧条件下Tunicamycin和Thapsigargin处理均能够有效诱导UPR,表现为IRE1、PERK、ATF6等信号通路相关蛋白的表达增加,同时eIF2α磷酸化水平升高;
3. 在低氧条件下,Tunicamycin和Thapsigargin处理能够提高细胞的存活率;
4. 进一步实
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