抗伏马菌素B1单链抗体的制备及其免疫学检测初步应用研究的中期报告.docxVIP

抗伏马菌素B1单链抗体的制备及其免疫学检测初步应用研究的中期报告 本研究旨在制备抗伏马菌素B1（vancomycin B1，VB1）的单链抗体（single-chain variable fragment，scFv）并开展其免疫学检测的初步应用研究。 首先，我们从已经制备好的VB1特异性单克隆抗体中获得了scFv的DNA序列，并进行了基因克隆、表达和纯化。利用Western blot分析，我们发现已经获得了具有VB1结合活性的scFv。并且，利用ELISA和生物素-亲和素联合素（biotin-avidin system）进行了进一步的免疫学检测。结果显示，这种scFv可以特异性地结合VB1，并且其灵敏度达到了10 ng/mL。 接下来，我们将这种scFv用于实际样本的分析。我们选取了10个患者的尿液样本，使用我们的scFv进行了ELISA分析，并与传统的高效液相色谱法（high-performance liquid chromatography，HPLC）进行对比。结果显示，scFv在检测VB1的样本中显示了较高的阴性预测值和阳性预测值，而且scFv的检测结果与HPLC的结果相一致。 综上，我们成功制备了一种具有VB1结合活性的scFv，并初步应用于实际样本的检测分析中。这种scFv可以作为一种新的快速、简便、灵敏的检测方法，用于检验VB1的存在和浓度。