大肠杆菌感受态细胞的制备原理步骤以及重组质粒转化解析.docx

一、目的 1.认识感觉态细胞生理特征及制备条件，掌握大肠杆菌感觉态细胞制备方法。 2.掌握质粒 DNA 转变大肠杆菌的方法，认识转变的条件和利用半乳糖苷酶基因插入失活选择 重组质粒 DNA 的原理。 二、原理 (一)大肠杆菌感觉态细胞制备的原理 所谓感觉态，是指细菌生长过程中的某一阶段的培育物，只有某一世长阶段中的细菌才能作为 转变的受体，能接受外源 DNA 而不将其降解的生理状态。感觉态形成后，细胞生理状态会发 生改变，出现各样蛋白质和酶，负责供体 DNA 的联合和加工等。细胞表面正电荷增添，通透 性增添，形成能接受外来的 DNA 分子的受体位点等。本实验为了把外源 DNA (重组质粒)