一种基于酵母DNA损伤应答高通量环境遗传毒性评估新方法的研究的中期报告.docxVIP

一种基于酵母DNA损伤应答高通量环境遗传毒性评估新方法的研究的中期报告 本研究旨在开发一种新的基于酵母DNA损伤应答的高通量环境遗传毒性评估方法。在本研究的中期报告中，我们已经完成了以下工作： 1. 实验确定了对酵母细胞DNA损伤的诱导剂 - 紫外线。我们通过检测细胞的DNA修复能力等一系列方法，验证了紫外线的诱导效果，并确定了适宜的诱导条件。 2. 我们通过血清学、PCR和Western blot等多种方法鉴定了酵母细胞的两个核心基因RAD6和RAD18，这两个基因在DNA损伤应答中起关键作用。 3. 我们构建了基于RAD6和RAD18的双融合表达载体，并通过转染实验验证了其在酵母细胞中的表达情况。 4. 我们使用高通量测序技术对酵母细胞在不同条件下的基因表达谱进行了比较分析，筛选出与DNA损伤应答相关的基因。 5. 我们利用CRISPR/Cas9技术建立了一套高通量的基因敲除系统，并对筛选出的关键基因进行了验证和优化。 总的来说，本研究已经在实验方法、技术手段和数据分析等方面取得了一些重要进展，下一步将继续深入开展基本研究和方法优化。