蛋白质多肽中的二硫键和中性寡糖的MALDI MS分析的中期报告.docxVIP

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  • 2023-09-13 发布于上海
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蛋白质多肽中的二硫键和中性寡糖的MALDI MS分析的中期报告.docx

蛋白质多肽中的二硫键和中性寡糖的MALDI MS分析的中期报告 二硫键在蛋白质结构和功能中扮演着重要角色,因此对二硫键的定量和定性分析非常关键。目前常用的方法包括还原法和碘化法,但这些方法都存在一定的局限性,如对样品处理时间较长、样品损伤等问题。因此,我们针对这些问题开展了基于MALDI-TOF MS的二硫键分析方法。 该方法的基本流程如下: 1. 样品制备:将蛋白质样品溶解在还原缓冲液中,加热一段时间后,用双丙酮去除余下的溶剂,再将样品用亚硝酸钠处理,使剩下的巯基被硝基化。 2. MALDI-TOF MS测量:用丙酸乙酯将样品完全溶解后,加入同等体积的辣根过氧化物酶,在手性离子不对称的环境中进行负离子质谱分析。 结果表明,该方法可对二硫键进行准确、快速和灵敏的检测,并且适用于不同类型的蛋白质样品。 另外,我们还开展了中性寡糖的MALDI-TOF MS分析,为中性寡糖的组成和结构鉴定提供了一种新的方法。该方法主要涉及到样品制备和质谱测量两个方面。 1. 样品制备:将中性寡糖样品溶解在甲醇中,加入可水解的辣根过氧化物酶,然后加热一段时间。 2. MALDI-TOF MS测量:用乙酸乙酯将样品完全溶解后,加入适量的辣根过氧化物酶,并在手性离子不对称的环境下进行负离子质谱分析。 结果表明,该方法对中性寡糖的组成和结构具有很高的分辨率和灵敏度,能够准确鉴定中性寡糖的组成和结构。

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