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本发明公开了一种棒杆菌中基因多拷贝整合方法，具体涉及一种在谷氨酸棒杆菌等棒杆菌中进行基因多拷贝整合的方法，属于基因工程领域。本发明提供的多拷贝整合系统是基于IScg1基因在谷氨酸棒杆菌有8个拷贝，通过不断进行整合质粒的转化及逐步提高的筛选压力将多个目的/外源基因表达框整合在染色体上，最后经过10轮进化，成功构建多拷贝整合目的基因的重组菌株。本发明提供的整合质粒以pBlueScriptIISK(‑)为骨架，携带IScg1的上下游同源臂、筛选标记基因、目的基因表达框。其中，所述筛选标记表达盒包括内
(19)国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 116732082 A
(43)申请公布日 2023.09.12
(21)申请号 202310699287.0 C12P 13/04 (2006.01)
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