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石斛MYB类转录因子基因克隆和功能初步研究的中期报告
本研究旨在通过克隆和功能分析石斛(Dendrobium nobile)MYB类转录因子基因(DnMYB),以期探究其在植物生长和代谢过程中的作用和调节机制。已进行的工作包括:
1. 针对已有的石斛转录因子家族基因序列,通过PCR扩增和克隆技术获得了DnMYB的全长cDNA序列;
2. 对获得的DnMYB基因序列进行了生物信息学分析,发现其编码的蛋白质长度为249个氨基酸,在其N端具有一个MYB DNA结合域,并可以被归为R2R3-MYB类别;
3. 据此,本研究设计了一系列DnMYB基因的原生质体表达载体,并将其转入到烟草(Nicotiana benthamiana)叶片中表达,结果显示DnMYB可以显著地增加转基因植物的根系生长和除氯酸盐盐(NaCl)胁迫下的生存力,同时也能够提高花生酸(PCA)等类别生物活性物质的含量,表明DnMYB在植物代谢过程中具有重要功能。
4. 另外,本研究还使用荧光共振能量转移技术(FRET)和酵母双杂交实验研究了DnMYB与其他调控因子的相互作用模式,结果表明DnMYB可以和多种转录因子和蛋白激酶形成复合物,其功能机制还需进一步研究。
资料收集、实验设计和展示方面,本研究还有待进一步完善。
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