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第16章;RNA;在生物界,RNA合成有两种方式:;转录的知识是理解许多生物学现象和医学问题所必需的。
对于RNA生物过程的调节可以导致蛋白质合成速率的改变,以及由此而引发的一系列代谢变化, 因此,了解RNA代谢的基本原理就甚为重要。这些原理既关系到所有生物是如何适应环境变化的,也关系到细胞结构和功能的分化机制。 ;本章内容;原核生物转录的模板和酶
Templates Enzymes
in Prokaryotic Transcription;本节教学大纲;生物体以DNA为模板合成RNA的过程。;参与转录的物质 (反应体系):;转录的特点;不对称转录 (asymmetric transcription)
在DNA分子双链上,按碱基配对规律,能指导转录生成RNA的一股链作为模板指导转录,另一股链不转录,这种模板的选择性,称为不对称转录。;DNA双链中按碱基配对规律能指引转录生成RNA的一股单链,称为模板链 (template strand)。
与模板链相对的另一股单链,不用作转录模板,其碱基序列除T/U有别外,和转录产物RNA序列相同,称为编码链 (coding strand)。;5′·····GCAGTACATGTC····· 3′
3′·····CGTCATGTACAG····· 5 ′
5 ′····GCAGUACAUGUC ···3 ′
N??? Ala Val His Val ???C;5?
3?;二、RNA pol催化RNA合成;依赖DNA的RNA pol催化RNA合成的机制 ;DNA pol在启动DNA链延长时需要引物存在,而RNA pol不需要引物就能直接启动RNA链的延长。
RNA pol和双链DNA结合时活性最高,但是只以双链DNA中的一股DNA链为模板。
RNA pol与DNA的特殊序列启动子(promoter) 结合后,就能启动RNA合成。 ;(二)RNA pol由多个亚基组成;19;20;α 决定哪些基因被转录
β 催化聚合反应
β′ 结合模板,双螺旋解链
σ 辨识起始点,结合启动子;大肠杆菌内有一些不同的RNA pol全酶,其差异是σ亚基的不同。目前已发现多种σ亚基,并用其分子量命名区别,最常见的是σ70(分子量70 kDa)。σ70是辨认典型转录起始点的蛋白质,大肠杆菌中的绝大多数启动子可被含有σ70因子的全酶所识别并激活。
但有些基因的启动子,如热激蛋白也为另外的σ亚基(σ32)识别。;三、RNA pol结合到DNA的启动子上启动转录;调控序列中的启动子(promoter)是RNA pol结合的部位,也是控制转录的关键部位。原核生物以RNA pol全酶结合到DNA的启动子??而启动转录,其中由σ亚基辨认启动子,其他亚基相互配合。;RNA pol保护法;;RNA pol全酶在转录起始区的结合:;28;29;复制和转录的异同;31;32;33;原核生物的转录过程
The Process of Transcription in Prokaryote;熟悉:原核生物RNA转录过程——转录起始、延长、终止。 ;原核生物的转录过程分为三个阶段 ;RNA pol必须准确地结合在转录模板的起始区域。
DNA双链解开,使其中的一条链作为转录的模板。;RNA pol全酶(?2????)与模板结合,形成闭合转录复合体 (closed transcription complex);
DNA双链局部解开约17bp,形成开放转录复合体 (open transcription complex) ;
在RNA pol作用下发生第一次聚合反应,形成第一个磷酸二酯键。;原
核
生
物
转
录
起
始
过
程;磷酸二酯键的形成;二、RNA pol核心酶独立延长RNA链;转录的延长;转录泡:在转录延长过程中,DNA双链需解开约17bp,形成的局部单链区象一个小泡,称为转录泡。;为了保持局部的转录泡状态,在RNA pol下游的DNA需不断解链,可使其下游的DNA(未解开双链部分)越缠越紧,形成正超螺旋,而其上游DNA变得松驰,产生负超螺旋,需要解旋酶和拓扑异构酶来消除这些现象。;45;原核生物转录过程中的羽毛状现象;依赖ρ因子的转录终止
非依赖ρ因子的转录终止;(一)依赖ρ因子的转录终止;ρ因子的作用原理:;依赖ρ因子的转录终止过程:;(二) 非依赖ρ因子的转录终止;RNA ;茎环结构使转录终止的机制;非依赖ρ因子的转录终止过程:;小 结;56
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