HPLC法在国内外药典中的应用与比较.pptxVIP

HPLC法在国内外药典中的应用与比较 山东省药品检验所化学药品科王小兵9/18/20231山东省药品检验所 汇报的主要内容 一、简述 二、高效液相色谱仪 三、系统适用性 四、色谱条件的调整 五、HPLC的应用及方法开发9/18/20232山东省药品检验所 一、简述《中国药典》2010年版二部共收载2271个品种，新增品种330个，修订品种1500个，涉及HPLC检测项目的品种有1291个，占总品种的57%，其中新增/修订926个。HPLC法在整个药典品种的检验中占有重要地位。9/18/20233山东省药品检验所 High Performance Liquid Chromatography简称HPLC，开始应用于20世纪60年代后期，现已趋于成熟，广泛应用于医药、生化、天然产物主要组分分析，以及食品、化妆品分析，环境分析，农业分析，石油化工分析等。优点：高压+高速+高效+高灵敏度一、简述9/18/20234山东省药品检验所 CHP(2010)：《中国药典》2010年版USP：United Stated Pharmacopoeia EP：European PharmacopoeiaJP：Japanese Pharmacopoeia一、简述9/18/20235山东省药品检验所 定义CHP(2010)附录V D：HPLC系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱，对供试品进行分离测定的色谱方法。USP(32)621：High-pressure liquid chromatography (HPLC), sometimes called high-performance liquid chromatography, is a separation technique based on a solid stationary phase and a liquid mobile phase. Separations are achieved by partition, adsorption, or ion-exchange processes, depending upon the type of stationary phase used.9/18/20236山东省药品检验所 定义EP(6.0) 2.2.29：Liquid chromatography is a method of chromatographic separation based on the difference in the distribution of species between two non-miscible phases, in which percolates through a stationary phase contained in a column.9/18/20237山东省药品检验所 定义JP(XV)2.01：Liquid chromatography is a method to develop a mixture injected into a column prepared with a suitable stationary phase by passing a liquid as a mobile phase through the column, in order to separate the mixture into its components by making use of the difference of retention capacity against the stationary phase, and to determine the components.9/18/20238山东省药品检验所 二、高效液相色谱仪基本组成：9/18/20239山东省药品检验所 泵CHP(2010)USP(32)EP(6.0)JP(XV) 未解释满足等度和梯度洗脱;压力：5000psi或更高;最大可达10ml/min可满足等度或梯度洗脱只强调了恒定速率泵的种类很多，目前应用最多的是柱塞往复泵（恒流泵）9/18/202310山东省药品检验所 进样器CHP(2010)USP(32)EP(6.0)JP(XV)未解释微量进样器定量环自动进样器手动 / 自动强调重复性好即可9/18/202311山东省药品检验所 色谱柱—分离的核心CHP(2010)附录：1.正相：硅胶柱； 反相： C-18柱、C-8柱；2.粒径：普通3～10μm； 2μm（亚-2μm仅能用于UPLC）；3.温度要求：以硅胶为载体的通常 40℃；不宜超过60 ℃；4.pH要求：2～8；2，化学键合相脱落8，硅胶溶解以5μm最为常见9/18/202312