单核细胞增生李斯特菌单克隆抗体制备及荧光微球免疫层析试纸条的研制的中期报告.docxVIP

单核细胞增生李斯特菌单克隆抗体制备及荧光微球免疫层析试纸条的研制的中期报告 摘要： 单核细胞增生李斯特菌（LM）是一种重要的细菌致病菌，能引起人类严重的肠道和神经系统感染。为了更好地检测LM感染和预防其传播，本研究利用李斯特菌单克隆抗体（mAb）制备荧光微球免疫层析试纸条，以检测LM的存在和浓度。本中期报告介绍了实验过程和初步结果，包括免疫原蛋白的制备、mAb的筛选和纯化、荧光微球的制备以及免疫层析试纸条的制备。 方法： 1. 免疫原蛋白制备：选取LM的表面蛋白内膜蛋白（InlA）为免疫原蛋白，经过表达、纯化和肽段分析，得到纯化的InlA蛋白。 2. mAb的筛选和纯化：通过体外免疫法筛选得到的LM的InlA特异性mAb，经过纯化得到高纯度mAb。 3. 荧光微球的制备：将荧光染料结合到5μm直径的有机硅微球上，制备出荧光微球。 4. 免疫层析试纸条的制备：将mAb接到荧光微球上，将纯化的mAb固定于膜上，制备出免疫层析试纸条。 结果与结论： 1. InlA纯化蛋白的SDS检测结果表明，纯度达到约95%。 2. 体外免疫筛选得到9个InlA特异性mAb，其中1个mAb表现出良好的交叉反应性和灵敏度。 3. 制备出的荧光微球大小均一，荧光稳定。 4. 制备出的免疫层析试纸条满足检测要求，灵敏度达到10^3 CFU/mL。 未来工作： 1. 进行临床样品的测试并进行数据分析； 2. 在