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HIV-1跨膜蛋白gp41在大肠杆菌中的表达及纯化的中期报告
本研究的目的是在大肠杆菌中表达HIV-1跨膜蛋白gp41并进行纯化,以期获得纯度高的gp41蛋白用于后续的功能研究。
首先,我们将HIV-1 gp41基因插入到大肠杆菌表达载体中,并进行的DNA测序确认。接着,我们将该重组质粒转化到大肠杆菌中进行表达,获得了相应的表达菌株。通过匀浆和离心处理,我们获得了表达的菌株的菌体沉淀。
接下来,我们使用超声波细胞破碎法将细菌沉淀打散,并进行离心分离,得到包含gp41蛋白的上清液。由于gp41蛋白是跨膜蛋白,所以我们使用了特殊的膜蛋白提取方法,包括了非离子型、离子型和上清液接头提取法,最终得到了纯度较高的gp41蛋白。我们使用SDS和Western blotting检测表达和纯化过程中gp41蛋白的存在,并进一步进行了质谱分析以证实其质量和完整性。
我们的结果表明,我们已经成功地表达并纯化了HIV-1 gp41蛋白。下一步,我们将对其进行进一步的功能和结构研究,以了解其在HIV感染过程中的作用。
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