由HCV包膜蛋白点突变研究脂蛋白在病毒生命周期中的作用的中期报告.docxVIP

由HCV包膜蛋白点突变研究脂蛋白在病毒生命周期中的作用的中期报告 本研究旨在探究HCV包膜蛋白点突变对脂蛋白在病毒生命周期中的作用的影响。本中期报告主要介绍实验设计及初步结果。 实验设计： 1. 采用HCV JFH-1株感染HEK 293T细胞，使用免疫印迹法检测感染后细胞内脂蛋白B和C等脂蛋白的表达水平； 2. 通过PCR技术构建突变体，将HCV包膜蛋白中位于E1和E2连接区域的氨基酸序列替换成对应的突变体氨基酸序列； 3. 利用Western blot检测突变后的HCV包膜蛋白在HEK 293T细胞内的表达情况，并比较与野生型HCV的差异； 4. 通过逆转录实时聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测HCV RNA的复制情况及病毒载量。 初步结果： 1. 实验成功构建了突变型HCV JFH-1株，并使用Western blot技术证实了HCV包膜蛋白点突变对其表达有影响； 2. 感染后，HEK 293T细胞内脂蛋白B和C等脂蛋白表达水平与野生型HCV感染组相比，存在一定程度的降低； 3. qRT-PCR结果显示，突变型HCV JFH-1株的复制情况与野生型HCV JFH-1株相比，存在显著差异，但还需要进一步验证。 结论： 本研究初步证实了HCV包膜蛋白点突变对脂蛋白在病毒生命周期中的作用具有一定影响。但是，由于研究还处于中期，实验结果有限，因此需要进一步深入研究。