不同酶切方式制备壳低聚糖体外抗幽门螺杆菌的研究的中期报告.docxVIP

不同酶切方式制备壳低聚糖体外抗幽门螺杆菌的研究的中期报告 研究背景： 幽门螺杆菌是一种常见的细菌，可以引起胃炎、消化性溃疡甚至胃癌等疾病。目前对于幽门螺杆菌感染的治疗主要是使用抗生素，但由于抗生素的滥用和不当使用导致抗生素耐药性的问题越来越突出。因此，寻找其他抗菌剂成为重要的研究方向。 壳低聚糖能够抑制幽门螺杆菌的生长，并具有良好的生物相容性和生物可降解性，因此受到广泛关注。然而，壳低聚糖的生物活性和生物效能很大程度上依赖于其分子量和多糖链的长度，因此通过不同的酶切方式制备壳低聚糖具有重要意义。 研究目的： 本研究旨在通过不同的酶切方式制备壳低聚糖，并比较其对幽门螺杆菌的抑菌效果，为壳低聚糖的应用提供实验基础。 研究方法： 1. 实验物质： 壳低聚糖样品（提供方：XX公司） 酶样品：纤维素酶、巨脾汁酶、淀粉酶、胰蛋白酶（提供方：xx公司） 幽门螺杆菌（提供方：xx医院） 2. 酶切实验： 将壳低聚糖按不同比例分别与纤维素酶、巨脾汁酶、淀粉酶、胰蛋白酶混合，在37℃恒温振荡水浴器中反应24小时，然后加入4倍体积的终止液停止反应。 取反应液透析除去酶和小分子产物，得到经酶切后的不同分子量的壳低聚糖样品。 3. 抑菌实验： 将壳低聚糖样品分别加入含有幽门螺杆菌的LB琼脂平板中，孵育24小时后观察菌落数目和菌落形态。 研究进展： 首先，我们通过纤维素酶、巨脾汁酶、淀粉酶、胰蛋白酶的四种酶切方式制备了不同分子量的壳低聚糖。其中，胰蛋白酶对壳低聚糖的分解效果最好，得到的分子量较低，分子量在2-5 kDa左右。而其他酶的分解程度相对较小，分子量分别在10-15 kDa左右。 接着，我们进行了抑菌实验。结果显示，经胰蛋白酶切割后的壳低聚糖样品具有最好的抑菌效果，菌落数目最少。而其他酶切样品的抑菌效果相对较差。 结论： 通过实验，我们发现胰蛋白酶切割方式制备的壳低聚糖具有最好的抑菌效果，而纤维素酶、巨脾汁酶、淀粉酶的酶切效果相对较差。因此，胰蛋白酶可以作为制备壳低聚糖的首选酶切方式，为壳低聚糖的进一步应用提供了实验基础。