全人源抗H5N1型禽流感病毒scFv广谱中和抗体的制备、鉴定及保守中和表位.pdfVIP

5/24/2020 全人源抗H5N1型禽流感病毒scFv 广谱中和抗体的制备、鉴定及 全人源抗H5N1型禽流感病毒scFv 广谱中和抗体的制备、鉴定及 保守中和表位的分析 保守中和表位的分析 禽流感是由 A 型流感病毒引起的禽类传染病,近十年来,以H5N1 型为代表的 禽流感是由 A 型流感病毒引起的禽类传染病,近十年来,以H5N1 型为代表的 高致病性禽流感 (highly pathogenic avian influenza, HPAI) 肆虐全球,不仅给 高致病性禽流感 (highly pathogenic avian influenza, HPAI) 肆虐全球,不仅给 世界养禽业造成损失,甚至出现了越来越多的人感染 H5N1 型禽流感致死病例,已 世界养禽业造成损失,甚至出现了越来越多的人感染 H5N1 型禽流感致死病例,已 有人传人禽流感病例的报道 [5-6]。由于人体内没有针对禽流感病毒的抗体,特别 有人传人禽流感病例的报道 [5-6]。由于人体内没有针对禽流感病毒的抗体,特别 是针对H5 抗原的抗体,所以人感染H5N1 型禽流感病毒后具有较高的致死率,对人 是针对H5 抗原的抗体,所以人感染H5N1 型禽流感病毒后具有较高的致死率,对人 类健康和世界公共卫生安全已构成重大威胁。 类健康和世界公共卫生安全已构成重大威胁。 目前针对人间H5N1 型禽流感大流行的防控措施主要有两种,一是疫苗 目前针对人间H5N1 型禽流感大流行的防控措施主要有两种,一是疫苗 [10-11],但由于流感病毒不同毒株间存在抗原差异且变异频繁 [12],使得新开发 [10-11],但由于流感病毒不同毒株间存在抗原差异且变异频繁 [12],使得新开发 的疫苗往往滞后于疫情暴发[13]。二是化学药物,主要包括 M2 蛋白阻滞剂,如金 的疫苗往往滞后于疫情暴发[13]。二是化学药物,主要包括 M2 蛋白阻滞剂,如金 刚烷胺和金刚乙胺；神经氨酸酶抑制剂,如奥司他韦和扎那米韦等。 刚烷胺和金刚乙胺；神经氨酸酶抑制剂,如奥司他韦和扎那米韦等。 但化学药物过量使用会产生耐药性和容易引起服用者精神异常等副作用 但化学药物过量使用会产生耐药性和容易引起服用者精神异常等副作用 [16-17]。作为疫苗和化学药物的有效补充,由抗体介导的预防和临床治疗措施已 [16-17]。作为疫苗和化学药物的有效补充,由抗体介导的预防和临床治疗措施已 显现良好的效果,其应用前景得到专家的认同 [18-19]。 显现良好的效果,其应用前景得到专家的认同 [18-19]。 因此,研发人源化或全人源基因工程抗体用于禽流感临床治疗具有重要的应 因此,研发人源化或全人源基因工程抗体用于禽流感临床治疗具有重要的应 用价值。利用噬菌体展示技术构建全人源抗 H5N1 型禽流感病毒免疫型 scFv 噬菌 用价值。利用噬菌体展示技术构建全人源抗 H5N1 型禽流感病毒免疫型 scFv 噬菌 体抗体库,筛选具有广谱中和活性的 scFv 抗体,并对其保守中和表位进行分析, 体抗体库,筛选具有广谱中和活性的 scFv 抗体,并对其保守中和表位进行分析, 为 H5N1 型禽流感的防治提供一个候选抗体药物,也为亚单位疫苗的研制提供新 为 H5N1 型禽流感的防治提供一个候选抗体药物,也为亚单位疫苗的研制提供新 的思路。 的思路。 研究方法 1.构建全人源抗 H5N1 型禽流感病毒免疫型 scFv 噬菌体抗体库取 研究方法 1.构建全人源抗 H5N