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牛胚胎移植技术的应用 牛胚胎移植技术是继人工繁殖技术之后的一项新技术。目前, 牛胚胎移植技术的发展已十分成熟, 效果也很稳定。供体母牛超数排卵平均每头次获胚胎5枚以上, 单头次最多可达30枚以上, 受体牛移植受胎率50%以上, 甚至可达70%以上。此外, 受体牛同期发情平均发情率90%以上, 可移植受体70%以上。但技术上的成熟与进步并不代表该产业在我国的发展与进步, 其原因笔者认为主要有以下3方面因素:第一, 对牛胚胎移植技术及其技术优势——认识不足;第二, 对牛胚胎移植技术的有效应用——定位不准;第三, 对牛胚胎移植技术操作及其相关原理——掌握不够。本文将从这三个方面进行全面系统地讲解, 希望通过该讲座, 普及牛胚胎移植技术, 使更多的繁育技术人员掌握这项技术, 使更多的养牛场 (户) 能够全面地认识这项技术并有效地应用这项技术, 以此提高奶、肉或兼用牛品质, 为养牛场 (户) 带来更大的经济效益, 促进牛产业的发展。 1 完善其应用的认识 牛胚胎移植技术是一个系统工程, 要全面了解和认识牛胚胎移植技术, 应该从以下几方面来认识:第一, 较全面地理解其含义;第二, 了解其应用的生理基础;第三, 遵守一些必要的操作原则;第四, 认识其技术优势;第五, 对人工授精技术与胚胎的移植技术在操作上的异同点进行比较, 有比较才有鉴别, 有比较才能更好地理解和认识这项技术。 1.1 体外受精神血工移植 牛胚胎移植技术是将生产性能优秀, 遗传性能稳定的优秀供体经过同期发情, 超数排卵的发情母牛进行配种 (与之交配的公牛也是经过严格选择的优秀供体公牛, 见下文“供体母牛的人工授精”的讲解) , 使之超出自然状态下几倍, 甚至十几倍的卵子受精, 然后在发情周期的第7天 (发情日为第0天) 采用非手术法收集胚胎, 并进行必要的显微镜处理 (进行胚胎的检出、清洗、鉴定与分级、冷冻保存等处理) 后, 鲜胚或冻胚移植给与之发情周期相同的受体母牛体内, 使之继续发育直至分娩的技术, 也有人通俗地称之为“借腹怀胎”技术。提供胚胎的个体称为供体牛, 接受胚胎的个体称为受体牛。胚胎移植的实际含义是提供胚胎的供体和接受胚胎的受体分工合作完成繁育后代的任务。但是, 胚胎移植产生的后代, 遗传物质来自于真正的亲代, 即供体母牛和与之交配的公牛, 而发育所需要的营养物质从受体获得。 1.2 生殖器官的孕向发育及其学习 胚胎移植技术能够在生产实际中获得成功, 其科学的理论基础是什么呢?主要有以下四个方面的理论基础:第一, 生殖器官的孕向发育;第二, 早期胚胎的“游离性”和“自养性”;第三, 胚胎移植无免疫排斥反应;第四, 遗传物质的稳定遗传。 1.2.1 受精母片在生殖系统中的作用 母牛在发情后的最初一段时期 (周期性黄体期, 一般在15天以内) , 无论是否受精, 母牛生殖系统均处于受精后的生理状态, 在生理现象上, 受精与未受精并无区别。它使不配种的受体母牛可以接受外来胚胎, 并为胚胎发育提供各种条件。所以, 发情后的母牛生殖器官的孕向变化, 是进行胚胎移植最主要的生理学依据。 1.2.2 妊娠和妊娠的发育时间 胚胎在发育早期的一段时间 (附植之前35天) 是独立存在的, 还未和子宫建立实质性联系, 它的发育基本上靠本身贮存的养分。所以, 胚胎在离开活体情况下, 在短时间内可以存活, 而且胚胎通过冷冻保存技术也可以长期保存。当放回与供体相同生理环境的受体子宫内时, 可以继续发育, 直至妊娠和分娩。因此, 胚胎的游离性和自养性是胚胎收集和体外处理成为移植获得成功的基本条件。 1.2.3 对胚胎和胎膜组织的免疫排斥 受体母畜的生殖道 (子宫和输卵管) 对于具有外来抗原物质的胚胎和胎膜组织, 一般来说, 在同一物种之内, 并没有免疫排斥现象, 这一点对胚胎由一个个体移植给另一个个体继续发育极为有利。 1.2.4 组织联系的保证 移植的胚胎, 在一定时期会和受体子宫内膜建立生理上和组织上的联系, 从而保证了以后的正常发育。但是, 胚胎与受体这种生理上和组织上的联系并不会对胚胎产生遗传上的丝毫影响, 更不会影响胚胎固有的优良性状。 1.3 受胎率较高的操作原则 牛胚胎移植技术的应用虽然具有科学的理论基础, 但要获得较高的受胎率, 也要遵循一些必要的操作原则, 只有这样, 才能把这种理论上成立的技术广泛地、高效地应用于生产实践。 1.3.1 移植胚胎的时间 胚胎移植后的生活环境和胚胎的发育阶段相适应, 包括: (1) 生理上的一致性:供体和受体在发情周期上的一致性。牛胚胎从受体子宫内采出时是发情后第几天, 也要把它移植发情后第几天的受体牛子宫内。当然, 胚胎具有一定的耐受期限 (一般为24小时内) , 但实践经验告诉我们, 这种生理上的一致性越吻合, 受胎率越高。目前, 采