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- 2023-09-26 发布于上海
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茎环型引物-环介导等温扩增技术检测奶粉中单增李斯特菌的研究的中期报告
茎环型引物-环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一种新兴的核酸扩增技术,利用多个特异性引物同时作用于DNA模板,在等温条件下扩增目标序列。本研究旨在应用LAMP技术迅速检测奶粉中的单增李斯特菌。
在前期研究中,我们设计了一组针对单增李斯特菌16S rRNA基因的LAMP引物,并进行了体外扩增和电泳验证。结果表明,该引物组能够特异性扩增单增李斯特菌的16S rRNA基因,而对其他常见致病菌均无扩增产物。
随后,我们对不同来源的奶粉样品进行了实际应用的初步试验。首先,我们通过基于平板计数法进行的可培养菌数量检测,发现所有样品均存在单增李斯特菌污染,但数量不足以达到卫生标准。然后,我们使用之前设计的LAMP引物组进行了LAMP检测。结果显示,在通过前处理将样品DNA提取并纯化后,所有奶粉样品均成功扩增出单增李斯特菌16S rRNA基因片段,扩增产物大小与预期一致。考虑到LAMP技术具有操作简便、成本低廉、结果快速等特点,本研究将继续完善并进一步应用该技术,以实现对于奶粉中单增李斯特菌的快速检测与监测。
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