RNA的提取学习课件.pptVIP

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2023-09-26 发布于浙江
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RNA的提取学习课件.ppt

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RNA的提取台鞴猃酌琬嘿癯鹾;RNA和无RNA酶的环境原核生;应用RNA对细胞和分子生物学的;提取RNA 过程中防止RNA酶;RNA分离的实用方法既有简单直;处理RNA样品时必需仔细小心，;方案：工作区域应与进行普通;3)双蒸水(ddH2O)和溶液;4)用分子级的试剂和DEPC处;从组织中提取RNA则要注意： ;人汗含有RNA酶，故在所有步骤;一些组织像脾脏可能比其它组织含;分离后的RNA通过琼脂糖凝胶电;一步法分离RNA苊嵯颍唯芡杩漂;应用从组织或细胞中分离细胞的总;TRI REAGENT (;方案．用l mL T;4 ℃下12000g离心15m;4 ℃，12000g离心10m;RNA的检测：将样品稀释液于;对于dsDNA：[dsDNA];注意事项 1)OD310值是;小结所有可能与RNA接触的器材;逆转录聚合酶链式反应(RT—P;RT—PCR间接用来扩增从RN;对于—个成功的PCR反应来说，;许多计算机程序，诸如Prime;应用 1. 利用有限的总;逆转录 1) 用分光光度计测;0.5至 l ug RNA ;2uL 10xRT buffe;PCR扩增将以下组分混合(5;c．引物(0.2umol/L;一步法RT—PCR 籀褙绌危又;优点：一步法RT-PCR排除了;方案 0.1-1ug 总;小结：半定量时必需设计内参照。;进行基因克隆时应在引物上加酶切;谢谢！河腮毓粕胖剡戟似蛔恃衷采RNA的提取台鞴猃酌琬嘿癯鹾;RNA和无RNA酶的环境原核生;应用RNA对细胞和分子生物学的;提取RNA 过程中防止RNA酶;RNA分离的实用方法既有简单直;处理RNA样品时必需仔细小心，;方案：工作区域应与进行普通;3)双蒸水(ddH2O)和溶液;4)用分子级的试剂和DEPC处;从组织中提取RNA则要注意： ;人汗含有RNA酶，故在所有步骤;一些组织像脾脏可能比其它组织含;分离后的RNA通过琼脂糖凝胶电;一步法分离RNA苊嵯颍唯芡杩漂;应用从组织或细胞中分离细胞的总;TRI REAGENT (;方案．用l mL T;4 ℃下12000g离心15m;4 ℃，12000g离心10m;RNA的检测：将样品稀释液于;对于dsDNA：[dsDNA];注意事项 1)OD310值是;小结所有可能与RNA接触的器材;逆转录聚合酶链式反应(RT—P;RT—PCR间接用来扩增从RN;对于—个成功的PCR反应来说，;许多计算机程序，诸如Prime;应用 1. 利用有限的总;逆转录 1) 用分光光度计测;0.5至 l ug RNA ;2uL 10xRT buffe;PCR扩增将以下组分混合(5;c．引物(0.2umol/L;一步法RT—PCR 籀褙绌危又;优点：一步法RT-PCR排除了;方案 0.1-1ug 总;小结：半定量时必需设计内参照。;进行基因克隆时应在引物上加酶切;谢谢！河腮毓粕胖剡戟似蛔恃衷采