DB42T 1382-2018四倍体水稻光温敏雄性核不育系选育技术规程.docxVIP

ICS 65.020.20 B 05 备案号：60294-2018 DB42 湖 北 省 地 方 标 准 DB42/T 1382—2018 四倍体水稻光温敏雄性核不育系选育 技术规程 Technical regulation for breeding of photoperiod-thermo sensitive genic male sterile line in tetraploid rice 2018 - 08 - 22发布 2018-10-22实施 湖 北 省 质 量 技 术 监 督 局 发 布 DB42/T 1382—2018 目 次 前言 III 1 范围 1 2 规范性引用文件 1 3 术语与定义 1 4 不育株筛选指标检验方法 1 4.1 花粉不育度 1 4.2 自交结实率与自交不实率 2 5 不育系选育技术 2 5.1 离体染色体加倍 2 5.1.1 材料选择 2 5.1.2 外植体选择 2 5.1.3 愈伤组织诱导 2 5.1.4 愈伤组织染色体加倍 2 5.1.5 加倍愈伤组织分化出苗 2 5.1.6 试管苗移栽 2 5.1.7 倍性鉴定 3 5.2 PMeS基因导入光温敏雄性不育株 3 5.3 回交 3 5.4 回交后代中不育株的筛选 3 5.5 具有PMeS基因的不育株选择 3 5.6 不育株系自交加代 3 5.7 育性鉴定 3 Ⅲ DB42/T 1382—2018 前 言 本标准按照 GB/T1.1—2009 《标准化工作导则 第1部分：标准的结构与编写》给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由湖北大学提出。 本标准由湖北省农业厅归口管理。 本标准起草单位：湖北大学、武汉多倍体生物科技有限公司。 本标准主要起草人：宋兆建、蔡得田、张献华、王维、刘育华、何玉池。 DB42/T 1382—2018 四倍体水稻光温敏雄性核不育系选育技术规程 1 范围 本标准规定了四倍体水稻光温敏雄性核不育系选育的术语与定义，不育株筛选指标检验方法和不育 系选育技术。 本标准适用于四倍体水稻光温敏雎性核不育系的选育。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文 件一 报新 版 本 ( 包 括 所的 修 改 单 ) 适 用 于 本文 件。 NY/T 1215—2006,水稻光、温敏雄性核不育系育性鉴定规程 NY/T 2306—20122弄种苗组培快繁技术规程 DB33/T 752-2009植物种苗组培快繁技术规程 3 术语与定义 NY/T 1215+2008 |NY/T 2306—2013、0833/T 7522009界定的以及下列术语和定义适用于本标 准。 3.1 四倍体 Tetraploid 指体细胞内含有四全染色体组的生物体。 3.2 多倍体减数分裂稳 定性水 稻品系 Polyploid meiosis stability rice lime 简称PMeS 品系，指具有减数分裂稳定性和高结实性的多倍体水稻品系，其高结实性由PMeS 基因控 制。 3.3 稳定不育期 Period of stable male sterility 光温敏雄性核不育系处于彻底不育状态，且不育性保持稳定，无育性波动的时期。 4 不育株筛选指标检验方法 4.1 花粉不育度 每天上午取当天将开花的颖花(花药伸长至颖花长三分之二)进行花粉育性镜检，每单株取3穗以 上，每穗随机取3~5朵颖花的混合花粉，用1%I-KI 溶液染色制片，每片选花粉粒100粒以上的代表性视 野3个镜检计数各类花粉粒数。按深染(正常可育花粉)、浅染(染败)、圆败、典败、无花粉5种归类， 计算花粉不育度 (SP)。 以不育期花粉不育度≥99.9%作为不育株筛选标准。 计算公式： 2 DB42/T 1382—2018 SP(%)=(nl/NI×100 式中： SP n1 N1 花粉不育度； 单株检出的不育花粉数(染败数、圆败数与典败数之和); 单株镜检的花粉总数。 4.2自交结实率与自交不实率 种子成熟时考查套袋自交结实率(SF), 其中实粒以有淀粉形成为标准。以可育期自交结实率≥30%,