实验13 cdna合成及rt pcr法研究基因表达.pdfVIP

实验13 c 的合成及RT-PCR法研究 的表达 原理：逆转录PCR，或者称反转录PCR(reverse transcriptio R, RT- PCR)，是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。 表达检测有几种方法，主要包括原位杂交、Northern实验、RNA酶 保护实验，Real-tine PCR 以及半定量RT-PCR等。其中半定量RT-PCR 由于 操作简单，检测mRNA水平的表达灵敏，被作为检测 表达的主要 之 一。RT-PCR是指将逆转录(Reverse Transcription；RT)反应和 PCR(Polymerase Chain Reaction)反应组合在一起的方法，其主要是以管家 （beta-actin或GAPDH ）作为内参，对某一 在mRNA的水平上进行 检测或定量。RT-PCR将以RNA为模板的c 合成同PCR结合在一起，提 供了一种分析 表达的快速灵敏的方法。RT-PCR还可用来检测 表达 差异或不必构建c 文库克隆c 。RT-P