S型短链脱氢酶的克隆、鉴定及其催化制备S-CHBE的研究的中期报告.docx

S型短链脱氢酶的克隆、鉴定及其催化制备S-CHBE的研究的中期报告 本次研究旨在克隆和鉴定S型短链脱氢酶，并探究其在催化制备S-CHBE中的应用。 首先，我们利用PCR扩增技术从S型酵母菌基因组中克隆得到了S型短链脱氢酶基因（S-LDH）。随后，通过测序结果和生物信息学分析，确认所克隆的S-LDH基因长度为1476 bp，编码491个氨基酸。 之后，我们利用重组表达系统对S-LDH基因进行亚克隆，按照先前报道的方法表达和纯化了S-LDH蛋白。通过SDS和Western blot结果表明，我们成功地表达和纯化了S-LDH蛋白。 为了探究S-LDH蛋白在催化制备S-CHBE中的应用，我们进行了一系列实验。首先，利用HPLC和MS对催化反应产物进行了分析，并发现在S-LDH存在的情况下，可以高效地将3-巯基-1-丙醇氧乙烯醚（MPEC）转化为S-CHBE。同时，我们通过对不同反应物质浓度、温度和pH值等参数的优化，进一步提高了反应的产率和选择性。 综上，我们成功地克隆和表达了S型短链脱氢酶，并探究了其在催化制备S-CHBE中的应用。这为未来的生产工艺和工业应用提供了重要的基础数据。