大豆异黄酮的测定方法综述.docxVIP

鬲昌大摩 NANCHANGUNIVERSITY功能食品学综述论文 学院：生命科学与食品工程学院专业：食品科学与工程班级：食品科学与工程113班学号： 学生姓名： 指导教师： 起讫日期：2014年3月至2014年4月 摘要 大豆异黄酮的测定方法 摘要 本文在参考国内外大量文献的基础上，对大豆异黄酮的测定方法进行了系统的总结和介绍 关键词：大豆异黄酮；测定方法Abstract: Inreferenceonthebasisofalargenumberofliteratureathomeandabroad,thispapermethodofthedeterminationofsoybeanisoflavonesweresummarizedandintroduced Keywords:soyisoflavonesmethod 目录 摘要Abstract: TOC\o1-5\h\z \o CurrentDocument 目录II1根据紫外吸收特性检测方法1 1.1紫外分光光度法（UV）1 1.2三波长法（three-wavelengthUVspectrophotometry）1 \o CurrentDocument 2根据色谱原理检测方法2 2.1高效液相色谱法（HPLC）2 2.2高效液相色谱一质谱法（HPLC-MS）2 2.3气相色谱法（GC）2 2.4气相色谱一质谱法（GC-MS）3 2.5毛细管电泳法（CE）3 2.6薄层扫描色谱法（TLCS）3 2.7四标样快速测定法3 2.8双向纸层析色谱法（Two-dimensionalpaperchromatography）4 \o CurrentDocument 3根据医学免疫检测方法4 3.1时间分辨荧光免疫分析法（TR-FIA）.4 3.2酶联免疫吸附法（ELISA）.4 3.3放射免疫测定法5 \o CurrentDocument 4各检测方法系统归纳和分析5 \o CurrentDocument 附：各国际组织采用的检测方法及标准6参考文献7 大豆异黄酮（Soybeanisoflavones,ISO）是一种从大豆中分离提取活性成分，具有异黄酮类化合物典型结构，包括三种游离型异黄酮苷元和九种结合型大豆异黄酮。 根据大豆异黄酮分子结构，可用特征显色及荧光反应对其定性定量检测。目前主要检测方法有：利用紫外吸收特征，可采用紫外分光光度法（UV）、三波长法等进行大豆异黄酮定量检测；利用色谱原理检测大豆异黄酮方法为：高效液相色谱法（HPLC）、高效液相色谱一质谱法（HPLC-MS）、气相色谱法（GC）、气相色谱一质谱法（GC-MS）、毛细管电泳法（CE）、四标样快速测定法、薄层扫描色谱法（TLCS）、双向纸层析色谱法等。此外，医学上荧光免疫法：分辨荧光免疫分析法（TR-FIA）和酶联免疫吸附法（ELISA）等也是检测大豆异黄酮重要方法。至今我国尚未制定统-标准规范ISO检测方法，现对大豆异黄酮测定多采用HPLC法或气相色谱一质谱（GC-MS）联用法， 且毛细管电泳法（CE）将逐渐成为替代HPLC方法，广泛应用于大豆异黄酮主要组分（大豆苷元和染料木素等）测定。本文根据检测大豆异黄酮原理不同，暂归纳为三大类进行阐释，并对各种检测大豆异黄酮方法进行系统比较分析1根据紫外吸收特性检测方法 1.1紫外分光光度法（UV） 大豆异黄酮结构中羟基和芳香环形成共轭体系具有较强紫外光吸收特性，大豆异黄酮各组分最大吸收波长相差不大，峰数目较少。如染料木素在紫外区有很强吸收带，最大吸收波长为260nm；大豆苷元最大吸收波长为256nm，在310nm处有-个很小肩峰，这使紫外吸收作为评价指标成为可能。王哲等〔1〕用紫外分光光度法测定大豆异黄酮含量，以大豆苷元作标准品绘制标准曲线，建立回归方程，相关系数R2=0.9941、方法回收率100.4%、变异系数0.25%，证明此法可靠性好、回收率高、重现性高。 1.2三波长法（three-wavelengthUVspectrophotometry） 三波长法于1980年-经提出，便很快在岛津UV-250分光光度计上被采用，形成-种新方法。该法原理为：根据大豆异黄酮在240nm、260nm、280nm三个波长处吸光值，分别计算^A，计算方法为：△A=A260-（A240+A280）/2。根据三角形相似原理推得AA与待测物浓度成正比，进而求得待测物质浓度。鞠兴荣等〔2〕采用三波长紫外分光光度法测定大豆异黄酮含量，有效消除随浓度不同发生本底漂移、油脂等干扰物质、及吸收峰不对称给定量分析造成不良影响。此法简便、灵敏，最低检出浓度为1Ug/mL，加样回收率〉99%；证明该法具有良好准确性和精密度，适于大批量样品测定和产品生产质量控制及监测。 2根据色谱原理检测方法 2.1高效