大鼠髓过氧化物酶ELISA检测试剂盒.docxVIP

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素挤凝。3000转离心30分钟取上清。 分离。实验中不用的版条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。 分离。 实验中不用的版条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。 大鼠髓过氧化物酶（MPO）ELISA检测试剂盒 使用说明书 检测原理 试剂盒采用双挤体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被大鼠髓过氧化物酶（MPO）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测挤体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠髓过氧化物酶（MPO）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。 样品收集、处理及保存方法血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞剌激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20°C，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 自备物品酶标仪（450nm）高精度加样器及枪头：0.5-10UL、2-20uL、20-200uL、200-1000UL37°C恒温箱操作注意事项试剂盒保存在2-8°C，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。 标准品稀释液即可视为阴性对照或者空白；预处理后的样本无需稀释，直接取10ML加样即可。 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。 所有液体组分使用前充分摇匀。 试剂盒组成 名称 96孔配置 48孔配置 备注 微孔酶标板 12孔x8条 12孔x4条 无 标准品（480U/L） 0.6mL 0.6mL 按说明书进行稀释 标准品稀释液 6mL 3mL 无 样本稀释液 6mL 3mL 无 检测挤体-HRP 10mL 5mL 无 20x洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释 底物A 6mL 3mL 无 底物B 6mL 3mL 无 终止液 6mL 3mL 无 封板膜 2张 2张 无 说明书 1份 1份 无 自封袋 1个 1个 无 注：标准品用标准品稀释液依次稀释为：480、240、120、60、30、15U/L 试剂的准备 20x洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20x洗涤缓洗板方法手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水级上拍干，如此洗版5次。 自动洗板机：每孔注入洗液350ML，浸泡1min,洗板5次。 操作步骤从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需版条，剩余版条用自封袋密封放回4°C。 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50ML；待测样本孔先加待测样本10mL,再加样本稀释液40ML；随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物?（HRP）标记的检测挤体100mL，用封板膜封住反应孔，37°C水浴锅或恒温箱温育60min。 冲液加19份的蒸馏水。每孔加入底物A、B各50mL, 冲液加19份的蒸馏水。 每孔加入底物A、B各50mL,37°C避光孵育15min。 每孔加入终止液50儿15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。 结果判断 绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。 Y 3.0 2.0 1.0 0.5 0 . ▲ ■ k_ - standardsconcentration(X)试剂盒性能准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。 灵敏度：最低检测浓度水于1.0u/l。 特异性：不与其它可落性结构类似物交叉反应。 重复性：板内、版间变异系数均小于15%。 贮藏：2-8°C,避光防潮保存。 有效期：6个月免责声明试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。 严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。 FORRESEARCHUSEONLY. NOTFORUSEINDIAGNOSTICPROCEDURES. Ratmyeloperoxidase(MPO)ELISAKitinstructionIntendeduseThisMPOELISAkitisintendedLaboratoryforResearchuseonlyandisnotforuseindiagnosticortherapeuticprocedu