GPERshRNA表达载体的构建及其对血管内皮细胞增殖的影响的中期报告.docxVIP

GPERshRNA表达载体的构建及其对血管内皮细胞增殖的影响的中期报告 概述： 本实验旨在构建GPER shRNA表达载体，研究其对血管内皮细胞增殖的影响。中期报告主要介绍了实验的进展情况及初步结果。 方法： 1.设计GPER shRNA序列，并通过PCR扩增出shRNA模板; 2.克隆shRNA模板到pGPU6/GFP/Neo载体中，构建GPER shRNA表达载体; 3.通过限制性内切酶切割鉴定，筛选出重组的慢病毒载体; 4.用筛选出的慢病毒载体转染HUV-EC-C细胞株，进行稳定转染。 初步结果： 1.GPER shRNA表达载体构建成功，经鉴定符合预期的大小和序列; 2.成功筛选出符合要求的慢病毒载体; 3.经过多次稀释和筛选，成功获得稳定转染的HUV-EC-C细胞株; 4.采用CCK-8实验，初步发现GPER shRNA转染后，HUV-EC-C细胞增殖明显减慢（p0.05），与对照组相比，明显差异。 结论： 本实验初步成功构建了GPER shRNA表达载体，并初步研究了其对血管内皮细胞增殖的影响，实验结果显示GPER shRNA转染后，HUV-EC-C细胞增殖能力显著减弱。下一步将进一步探究其分子机制。