载脂蛋白A1模拟肽L4F对血管内皮细胞内质网应激凋亡途径的调控作用及机制的中期报告.docxVIP

载脂蛋白A1模拟肽L4F对血管内皮细胞内质网应激凋亡途径的调控作用及机制的中期报告 本研究旨在探究载脂蛋白A1模拟肽L4F（L4F）对血管内皮细胞（ECs）内质网（ER）应激凋亡途径的调控作用及机制。已完成以下实验与分析。 1. 细胞培养和处理 使用人类脐静脉内皮细胞（HUVECs）进行实验，分别将细胞分为对照组、ER应激诱导组和ER应激诱导+L4F干预组。对照组细胞无任何处理，ER应激诱导组细胞暴露于化学药物Tunicamycin（TM），ER应激诱导+L4F干预组细胞先暴露于TM，然后加入L4F。细胞培养后提取细胞蛋白。 2. Western blot分析 采用Western blot方法检测Bax、Bcl-2、Caspase-12、GRP78和CHOP表达。结果表明，ER应激诱导组相对于对照组，Bax表达上调，Bcl-2表达下调，Caspase-12、GRP78和CHOP表达上调，这些结果都表明ER应激诱导确实诱导了HUVECs的凋亡，且ER摄入量增加。 3. Real-time PCR分析 Real-time PCR检测Caspase-12、GRP78和CHOP mRNA水平的变化。结果与Western blot结果一致，即这些基因相对于对照组在ER应激诱导组中有显著上调的趋势，而L4F的加入则有明显的降低趋势。 目前实验结果表明，L4F干预可以降低HUVECs在ER应激下的凋亡，机制可能是通过调节Caspase-12、GRP78和CHOP表达降低ER应激造成细胞损伤。今后的工作将进一步深入研究L4F对ER应激下受损细胞的保护作用；同时探究L4F对其他细胞生命周期、迁移和血管生成等生物学过程的影响。