短乳杆菌NCL912连续培养生产γ-氨基丁酸研究的中期报告.docxVIP

短乳杆菌NCL912连续培养生产γ-氨基丁酸研究的中期报告 短乳杆菌NCL912是一种潜在的γ-氨基丁酸 (GABA) 生产菌株。本研究旨在通过连续培养法提高短乳杆菌NCL912的GABA生产能力，并研究其代谢途径中关键基因的表达。 在本研究中，利用改进的液态培养基，以短乳杆菌NCL912为实验菌株进行了10个连续批次的培养。结果表明，在连续培养的第6个批次后，GABA的生产显著增加，达到最高值（1.82 g/L）的时间为第8个批次。同时，GABA的产率从0.46 g/L提高到1.82 g/L，提高了约3.96倍。此外，代谢产物乳酸和乙酸的积累量明显减少，说明菌株能够更好地利用碳源和氮源进行GABA的生产，并降低了副产物的积累。 在分子水平上，本研究通过实时荧光定量PCR技术测定了GABA合成途径和代谢途径中重要基因（GluR、GabT、GAD、LDH和AdhE）的表达量，结果表明在连续培养过程中，这些基因的表达量都有所上调。其中，GluR的表达量在第6至第10个批次中显著上调，GabT和GAD的表达量在第8至第10个批次中显著上调。而LDH和AdhE的表达量在整个连续培养过程中都有所上调。这些结果表明，在连续培养过程中，短乳杆菌NCL912可以通过上调GluR、GabT和GAD的表达量，增强GABA的合成能力，并通过上调LDH和AdhE的表达量，增强GABA的代谢能力，从而提高GABA的生产能力。 综上，本研究证明了连续培养法是一种有效的提高短乳杆菌NCL912 GABA生产能力的方法。同时，通过对代谢途径中关键基因的表达量分析，提出了一种新的调控GABA生产能力的策略，为该菌株的工业化生产提供了理论依据。